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ダニ細胞株の実験室株と新規ノミ由来のフィールド株の単離と伝播
Isolation and Propagation of Laboratory Strains and a Novel Flea-Derived Field Strain of in Tick Cell Lines.
PMID: 32630209 DOI: 10.3390/microorganisms8070988.
抄録
は、昆虫や線虫を含むいくつかの無脊椎動物の細胞内共生体である。ＤＮＡはマダニに検出されているが、その存在は一般的に昆虫による寄生と関連している。ダニ細胞に感染して増殖することができるかどうかを決定するために、3種のダニからの細胞株、 , および , を、蚊の細胞株から単離された株StriおよびAlbBを接種した。マレーシアの猫から採取したノミから調製したホモジネートを細胞株に接種した。細菌の増殖および同一性は、顕微鏡観察およびPCR増幅および遺伝子断片の配列決定によってモニターされた。Stri株は細胞に感染し、29回の継代を経て維持された。また，AlbB株は細胞に感染し，2～5回の継代で維持された．スーパーグループFに属する新規な株（CfeFと命名）は、sp.ネコノミのプールから細胞内で単離され、9ヶ月間2回の継代を経てin vitroで維持された。これは、ノミからの株の分離が確認された最初のものであり、「パンデミック」AおよびBスーパーグループ以外の株の分離も初めてである。この研究は、ダニ細胞が複数の株を宿主とすることができ、昆虫細胞株のパネルに追加することで、フィールドでの.A.B.パンデミック株の分離の成功率を向上させることができることを実証しています。
are intracellular endosymbionts of several invertebrate taxa, including insects and nematodes. Although DNA has been detected in ticks, its presence is generally associated with parasitism by insects. To determine whether or not can infect and grow in tick cells, cell lines from three tick species, , and , were inoculated with strains Stri and AlbB isolated from mosquito cell lines. Homogenates prepared from fleas collected from cats in Malaysia were inoculated into an cell line. Bacterial growth and identity were monitored by microscopy and PCR amplification and sequencing of fragments of genes. The Stri strain infected spp. cells and was maintained through 29 passages. The AlbB strain successfully infected spp. and cells and was maintained through 2-5 passages. A novel strain of belonging to the supergroup F, designated CfeF, was isolated in cells from a pool of sp. cat fleas and maintained in vitro through two passages over nine months. This is the first confirmed isolation of a strain from a flea and the first isolation of any strain outside the "pandemic" A and B supergroups. The study demonstrates that tick cells can host multiple strains, and can be added to panels of insect cell lines to improve success rates in isolation of field strains of .