また、金ナノ粒子とCornus mas抽出物をフィト還元した金ナノ粒子は、Caco-2細胞に対するグリアジン効果の一部を緩和することが確認されました。

Gold nanoparticles phytoreduced with Cornus mas extract mitigate some of gliadin effects on Caco-2 cells.

• E M Domsa
• G A Filip
• D Olteanu
• I Baldea
• S Clichici
• A Muresan
• L David
• B Moldovan
• I Para
• M Suciu
• M Achim
• V Negrean
• V Andreica

抄録

セリアック病（CD）とは、遺伝的に素因がある人がグルテンを摂取することで小腸に障害が生じる自己免疫疾患です。現在まで認められている治療法は、厳格なグルテンフリーの食事療法です。このため、標準的な治療に加えて、新しい治療法や補助的な治療法の必要性が示唆されている。本研究では、グリアジンに曝露した、または曝露していないCaco-2細胞に対するCornus mas抽出物（CM）およびルテオリン（LT）と比較して、Cornus mas抽出物（AuCM）で植物合成した金ナノ粒子の効果を評価することを目的とした。AuCMの特性評価には紫外可視分光法と透過型電子顕微鏡を用いた。測定された細胞アウトカムには、酸化ストレスマーカー（マロンジアルデヒドレベル、カタラーゼ活性およびスーパーオキシドジスムターゼ活性）、炎症反応、およびアポトーシスに関与する細胞シグナルおよび転写因子（NFκB、pNFκB、NOS2、TNF-α、TRAIL、Bax、Bcl-2、p53）が含まれた。金ナノ粒子の細胞内への内在化は透過型電子顕微鏡(TEM)によって証明された。グリアジン投与は酸化ストレスを誘導し、抗酸化酵素の活性を改善し、NOS2およびNFκBの発現を増加させ、pNFκB/NFκB比を低下させた。また、グリアジンは、Caco-2細胞のTRAILおよびBcl-2レベルを増強し、p53発現を低下させた。また、AuCM、CM抽出物、LTによる前処理は、酸化ストレスを減少させ、NOS2活性を低下させた。AuCMおよびCM処理は、p53およびpNFκB/NFκB比の発現を増幅させ、Bcl-2、NFκBおよびpNFκBを減少させ、特にAuCMを減少させた。その結果、AuCMは酸化ストレスや炎症を調節することで、Caco-2細胞に対するグリアジン効果の一部を緩和することが確認されました。

Celiac disease (CD) is an autoimmune condition that occurs in genetically predisposed people where the ingestion of gluten produces damage in the small intestine. The treatment accepted until now is a strict gluten free diet. This implies the need for novel or adjuvant treatments, in addition to the standard of care. The present study aimed to assess the effect of gold nanoparticles phytosynthesized with Cornus mas extract (AuCM) compared to Cornus mas extract (CM) and luteolin (LT) on Caco-2 cells, exposed or not to gliadin. Ultraviolet-visible spectroscopy and transmission electron microscopy were used for the characterization of AuCM. Measured cellular outcomes included oxidative stress markers (malondialdehyde level, catalase and superoxide dismutase activities), inflammatory response and cellular signaling and transcription factors involved in apoptosis (NFκB, pNFκB, NOS2, TNF-α, TRAIL, Bax, Bcl-2, p53). The internalization of gold nanoparticles in cells was evidenced by transmission electron microscopy (TEM). The gliadin administration induced oxidative stress, improved the activity of antioxidants enzymes, increased NOS2 and NFκB expressions and reduced pNFκB/NFκB ratio. In addition, gliadin enhanced TRAIL and Bcl-2 levels and reduced p53 expression in Caco-2 cells. The pretreatment with AuCM, CM extract and LT diminished oxidative stress and reduced NOS2 activity. AuCM and CM treatment amplified the expression of p53 and pNFκB/NFκB ratio and diminished Bcl-2, NFκB and pNFκB, especially AuCM. The results obtained confirmed that AuCM mitigate some of gliadin effects on Caco-2 cells through modulation of oxidative stress and inflammation.