DS11由来の新規有機溶媒耐性プロテアーゼの発現と特性評価

Expression and characterization of a novel organic solvent tolerant protease from DS11.

• Xincai Wu
• Sibtain Ahmed
• Xiaolin Cui
• Jiahao Hang
• Shujun Wang
• Shu Liu
• Yaowei Fang

抄録

有機溶媒耐性プロテアーゼは、ペプチドの合成に多くの応用がある。本研究では、低コストで簡便に高濃度の有機溶媒耐性プロテアーゼを製造する方法を開発した。DS11由来の有機溶媒耐性プロテアーゼ（OSP）遺伝子をクローニングし、WB800で発現させた。組換えプロテアーゼの最適pHは9.0であった。組換えプロテアーゼの最適温度は40℃であった。組換えプロテアーゼをエタノールで精製したところ、収率は(87.33%)であった。エタノールで濃縮したOSPの収率は、Ni-キレートアフィニティークロマトグラフィーで濃縮した収率よりも高かったことから、組換えOSPをエタノールで沈殿させることは、有機溶媒に耐性のあるプロテアーゼを調製するための比較的安価で迅速な方法であることが示された。これらの結果は、この酵素が様々な産業用途で非常に有用であることを示している。

Organic solvent-tolerant proteases have many applications in the synthesis of peptides. In this study, we have developed a low-cost and convenient method to produce highly concentrated organic solvent-tolerant protease. Organic solvent tolerant protease (OSP) gene from DS11 was cloned and expressed in WB800. The optimum pH of the recombinant protease was 9.0. The optimum temperature of the recombinant protease was 40 °C. The recombinant protease was purified by ethanol with the yield of (87.33%). The yield of OSP enriched by ethanol was higher than that of by Ni-chelating affinity chromatography, which indicated that precipitation of the recombinant OSP with ethanol is a relatively low-cost and fast method for organic solvent -tolerant protease preparation. These results showed that this enzyme could be very useful in different industrial applications.