circPDSS1はWnt/β-カテニンシグナル伝達の活性化を介して大腸癌の発生を刺激する

circPDSS1 Stimulates the Development of Colorectal Cancer via Activating the Wnt/β-Catenin Signaling.

• Qun Fang
• Aijie Yang
• Anshan Dong
• Ligang Zhao

抄録

目的:

本研究では、circPDSS1とWnt/β-カテニンシグナルが大腸がんの発生に果たす役割を明らかにすることを目的としている。

Objective: This study aims to illustrate the role of circPDSS1 and the Wnt/β-catenin signaling in the development of colorectal cancer (CRC).

患者さんと方法:

CRC患者56人から、腫瘍から5cm以上離れた癌性粘膜および正常な副癌性粘膜組織を外科的に採取した。採取した組織およびCRC細胞株中のcircPDSS1レベルを定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）で検出した。circPDSS1がCRC患者の臨床的特徴に及ぼす影響を解析した。HCT-8およびHCT-116細胞においてcircPDSS1をノックダウンした後、Transwell、チューブ形成および創傷治癒アッセイにより表現型の変化を調べた。最終的にウェスタンブロットとレスキュー実験を行い、circPDSS1とWnt/β-カテニンシグナルのCRC発症における役割を明らかにした。

Patients and Methods: Cancerous mucosa and normal paracancerous mucosa tissues more than 5 cm away from the tumor were surgically collected from 56 CRC patients. circPDSS1 levels in collected tissues and CRC cell lines were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). The influence of circPDSS1 on clinical features of CRC patients was analyzed. After knockdown of circPDSS1 in HCT-8 and HCT-116 cells, phenotype changes were examined by Transwell, tube formation and wound healing assay. Western blot and rescue experiments were finally performed to uncover the role of circPDSS1 and the Wnt/β-catenin signaling in the development of CRC.

研究成果:

circPDSS1は、CRC粘膜組織では対照と比較して高発現していた。circPDSS1が高レベルであることは、リンパ系転移や遠隔転移の発生率が高く、CRC患者の予後不良を予測することが示唆された。circPDSS1のノックダウンは、CRC細胞の遊走能力と血管新生を低下させた。circPDSS1を導入したCRC細胞では、β-カテニン、GSK-3β、c-Myc、MMP-9、サイクリンD1を含むWnt/β-カテニンシグナル伝達の主要遺伝子のタンパク質レベルがダウンレギュレーションされていた。また、β-カテニンを過剰発現させることで、circPDSS1の役割を逆転させ、CRC細胞の遊走性や血管新生を抑制することが明らかになった。

Results: circPDSS1 was upregulated in CRC mucosa tissues than controls. High level of circPDSS1 predicted high rates of lymphatic metastasis and distant metastasis, and poor prognosis in CRC patients. Knockdown of circPDSS1 attenuated migratory ability and angiogenesis in CRC cells. Protein levels of key genes in the Wnt/β-catenin signaling, including β-catenin, GSK-3β, c-Myc, MMP-9 and cyclin D1 were downregulated in CRC cells transfected with sh-circPDSS1. Overexpression of β-catenin reversed the role of circPDSS1 in attenuating migratory ability and angiogenesis in CRC cells.

結論:

CRCにおけるcircPDSS1の過剰発現は、リンパ系転移、遠隔転移、全生存率と密接に関連しています。circPDSS1は、Wnt/β-カテニンシグナルを活性化することで、CRC細胞の遊走能や血管新生を刺激します。

Conclusion: Upregulated circPDSS1 in CRC is closely linked to lymphatic metastasis, distant metastasis and overall survival. It stimulates the migratory ability and angiogenesis in CRC cells via activating the Wnt/β-catenin signaling.

© 2020 Fang et al.