WRNはATM/p53シグナル伝達経路を介してヒト水晶体前庭細胞の酸化ストレスによるアポトーシスを抑制し、DNAメチル化により発現が低下することを明らかにした

WRN inhibits oxidative stress-induced apoptosis of human lensepithelial cells through ATM/p53 signaling pathway and its expression is downregulated by DNA methylation.

• Shengqun Jiang
• Jiansu Chen

抄録

背景:

アポトーシスと酸化ストレスは、加齢性白内障（ARC）の主な病因である。この論文では、水晶体上皮細胞（LEC）におけるWRNの役割を調べることを目的としています。

BACKGROUND: Apoptosis and oxidative stress are the main etiology of age related cataract (ARC). This article aims to investigate the role of WRN in lens epithelial cells (LECs).

方法:

アーク患者の前水晶体カプセル組織におけるWRNのメチル化レベルを推定した。SRA01/04（LECs）細胞をHOで処理し、または5-アザ-2-デオキシシチジン（5-Aza-2-デオキシシチジン）またはクロロキンと併用した。CCK8およびフローサイトメトリーを行い、増殖およびアポトーシスを探索した。活性酸素の含有量は、蛍光プローブDCFH-DAにより検出した。遺伝子およびタンパク質の発現は、定量的リアルタイムPCRまたはウエスタンブロットにより評価した。

METHODS: We estimated the methylation level of WRN in anterior lens capsule tissues of ARC patients. SRA01/04 (LECs) cells were treated with HO or combined with 5-aza-2-deoxycytidine (5-Aza-CdR) or chloroquine. CCK8 and flow cytometry were performed to explore proliferation and apoptosis. The content of ROS was detected by fluorescent probe DCFH-DA. The gene and protein expression was assessed by quantitative real-time PCR or western blot.

結果:

WRNはダウンレギュレーションされ、WRNのメチル化レベルは前水晶体カプセル組織で増加した。WRNの過剰発現と5-Aza-CdRはSRA01/04細胞の増殖を促進し、アポトーシスと酸化ストレスを抑制した。5-Aza-CdRはWRNの発現を増強した。WRNのノックダウンは、SRA01/04細胞の増殖を抑制し、アポトーシスと酸化ストレスを促進したが、5-Aza-CdRによってその効果が改善された。WRNの過剰発現と5-Aza-CdRはATM/p53シグナル伝達経路を抑制した。さらに、クロロキンはATM/p53シグナル伝達経路を活性化することで、SRA01/04細胞の増殖を抑制し、アポトーシスや酸化ストレスを促進した。クロロキンの影響は、WRNの過剰発現により消失した。

RESULTS: WRN was down-regulated and the methylation level of WRN was increased in the anterior lens capsule tissues. WRN overexpression and 5-Aza-CdR enhanced proliferation and repressed apoptosis and oxidative stress of SRA01/04 cells. 5-Aza-CdR enhanced WRN expression. WRN knockdown inhibited proliferation and promoted apoptosis and oxidative stress of SRA01/04 cells, which was rescued by 5-Aza-CdR. WRN overexpression and 5-Aza-CdR repressed ATM/p53 signaling pathway. Furthermore, chloroquine inhibited proliferation and promoted apoptosis and oxidative stress of SRA01/04 cells by activating ATM/p53 signaling pathway. The influence conferred by chloroquine was abolished by WRN overexpression.

結論:

本研究では、DNAメチル化を介したWRNがATM/p53シグナル伝達経路を介してヒトLECのアポトーシスや酸化ストレスを抑制することを明らかにした。

CONCLUSION: Our study reveals that DNA methylation mediated WRN inhibits apoptosis and oxidative stress of human LECs through ATM/p53 signaling pathway.