不死化したヒト子宮内膜間質細胞を移植した場合と移植していない場合の比較シークレットームプロファイル解析。予備的解析

Comparative secretome profile analysis of cultured immortalized human endometrial stromal cells supplemented with implanted versus nonimplanted blastocyst-conditioned medium: A preliminary analysis.

• Feng Xiong
• ZhiHong Yao
• PeiLin Chen
• Qing Sun
• HuiXian Zhong
• CaiYun Wan
• Yong Zeng

抄録

AIM:

ヒト子宮内膜間質細胞（HESC）は、以前に、異なる品質の胚を識別する能力があることが示されていました。ここでは、移植された胚盤胞条件培地（BCM）と非移植培地との間で、HESCの分泌物の特異的な反応を比較し、胚盤胞移植の評価に有用なサイトカイン候補を同定することを目的としています。

AIM: Human endometrial stromal cells (HESCs) were previously shown to be capable of discriminating embryos with different qualities. Here we aimed to compare the specific response of the HESC secretome to implanted blastocyst-conditioned medium (BCM) versus nonimplanted medium and identify cytokine candidates useful for the assessment of blastocyst implantation.

方法:

胚盤胞形成のための培地の１マイクロドロップで、開裂胚を個別に培養した。BCMは、5日目に新鮮な胚盤胞移植後に収集し、HESC培地を補充するために使用した。440個のサイトカインを網羅するハイスループット抗体アレイを、移植または非移植BCMで補充されたHESCの分泌タンパク質を検出するために使用した。

METHODS: Cleavage embryos were individually cultured in one microdrop of medium for blastocyst formation. The BCM was collected after fresh blastocyst transfer on day 5 and used to supplement HESC culture medium. A high-throughput antibody array covering 440 cytokines was used to detect the secretory proteins of HESCs supplemented with implanted or nonimplanted BCM.

結果:

移植群と非移植群を比較して、移植群のBCMを補充した造血幹細胞の上清中に440種類のサイトカインのうち、アップレギュレーションされた7種類のタンパク質とダウンレギュレーションされた15種類のタンパク質を含む、合計22種類の異なる発現を示すタンパク質が検出された。遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果、発現の異なるタンパク質は主に細胞の走化性と運動性、およびERK1/2カスケード制御に関与していることがわかった。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomesの解析により、マイトジェン活性化プロテインキナーゼとホスファチジルイノシトール3キナーゼ/Akt経路が主に関与していることが示唆された。

RESULTS: A total of 22 differentially expressed proteins were found out of 440 cytokines in the supernatant of HESCs supplemented with BCM from the implanted group compared to the nonimplanted group, including seven upregulated and 15 downregulated proteins. Gene Ontology enrichment analysis showed that the differentially expressed proteins were mainly involved in cell chemotaxis and motility, and ERK1/2 cascade regulation. Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analysis suggested that the mitogen-activated protein kinase and phosphatidylinositol 3 kinase/Akt pathways were mainly involved.

結論:

造血幹細胞は、特異的に異なる品質の胚盤胞からBCMに反応し、胚盤胞の品質評価のための新しいアプローチを開発するために使用することができる知見を得た。

CONCLUSION: HESCs specifically responded to BCM from different quality blastocysts, a finding that can be used to develop a novel approach for blastocyst quality assessment.

© 2020 Japan Society of Obstetrics and Gynecology.