活動性バセドウ病眼窩症時のBリンパ球におけるCXCL13およびそのケモカイン受容体CXCR5の発現変化

Altered expression of CXCL13 and its chemokine receptor CXCR5 on B lymphocytes during active Graves' orbitopathy.

• Shangtao Wan
• Miaoli Lin
• Yuxiang Mao
• Xiaoqing Chen
• Dan Liang

抄録

バセドウ病眼窩症（GO）患者における末梢B細胞の表現型異常を特徴づけ、特異的中和抗体を用いて、B細胞の恒常性との関連でケモカインCXCリガンド13およびその受容体5型（CXCL13/CXCR5）の役割を探る。 活動性GOの成人（n = 22）、不活動性GOの成人（n = 28）、および健常対照者（n = 28）を研究対象とした。末梢 B 細胞および B 細胞サブセットを定量し、フローサイトメトリーで CXCR5 発現を分析した。血清CXCL13濃度は、酵素結合免疫吸着アッセイにより測定した。化学走化実験には、Transwellプレートを使用し、遊走B細胞をフローサイトメトリーでさらに解析した。 健常者と比較して、活性型GO患者では、CD19 B細胞およびCD19CD27メモリーB細胞サブセット（それぞれ0.041および0.019）の数が有意に多かったのに対し、活性型GO患者では、これらの細胞数のわずかな増加（それぞれ0.062および0.087）が認められました。血清中CXCL13濃度は、活動性GO患者（86.9 ± 30.4 pg/mL）では、活動性GO患者（41.7 ± 18.1 pg/mL; P < 0.001）および健常者（36.2 ± 7.8 pg/mL; P < 0.001）よりも有意に高かった。CXCL13濃度の上昇は、臨床活動性スコアと正と有意に相関していた（r = 0.757、P < 0.001）。最後に、活動的なGO患者の血清は、B細胞とCD19CD27メモリーB細胞サブセットに対してより強い化学戦術活性を示しました。CXCL13またはCXCR5を中和抗体でブロックすると、B細胞の遊走が平均20％減少しました。 我々のデータは、異常なCXCL13/CXCR5発現が、活動的なGOで観察されるBリンパ球の恒常性の障害に寄与している可能性を示唆している。

To characterize the phenotypic abnormalities of peripheral B cells in patients with Graves' orbitopathy (GO) and explore the role of chemokine CXC ligand 13 and its receptor type 5 (CXCL13/CXCR5) in relation to B-cell homeostasis using specific neutralizing antibodies. Adults with active GO (n = 22), inactive GO (n = 28), and healthy control subjects (n = 28) were included in the study. Peripheral B cells and B-cell subsets were quantified and analyzed for CXCR5 expression by flow cytometry. The serum CXCL13 concentration was measured by enzyme-linked immunosorbent assays. For chemotactic experiments, Transwell plates were used, and migrating B cells were further analyzed by flow cytometry. Compared to healthy subjects, patients with active GO had a significantly higher number of CD19 B cells and the CD19CD27 memory B-cell subset ( = 0.041 and = 0.019, respectively), whereas a marginal increase in the number of these cells was found in patients with inactive GO ( = 0.062 and = 0.087, respectively). Serum CXCL13 levels were significantly higher in patients with active GO (86.9 ± 30.4 pg/mL) than in those with inactive GO (41.7 ± 18.1 pg/mL; P < 0.001) and in healthy subjects (36.2 ± 7.8 pg/mL; P < 0.001). The increased CXCL13 concentration was positively and significantly correlated with the clinical activity score (r = 0.757, P < 0.001). Finally, serum from patients with active GO exerted a stronger chemotactic activity towards B cells and the CD19CD27 memory B-cell subset. Blocking CXCL13 or CXCR5 with neutralizing antibodies reduced B-cell migration by a mean of 20%. Our data suggest that aberrant CXCL13/CXCR5 expression may contribute to the deficits in B-lymphocyte homeostasis observed in active GO.