エクソソソームは、グリオーマにおける軸を調節することで、腫瘍の進行とテモゾロミド抵抗性を促進する

Exosomal Facilitates Tumor Progression and Temozolomide Resistance by Regulating Axis in Glioma.

• Chengchen Han
• Shuwei Wang
• Hongwei Wang
• Jianning Zhang

抄録

神経膠腫患者のテモゾロミド（TMZ）治療に対する耐性は、臨床治療の制限要因となっている。環状RNA HIPK3 ()がグリオーマで高発現していることが確認されたが、TMZ耐性細胞からのエクソソームの役割と潜在的なメカニズムはまだよくわかっていない。 エクソソソームを透過型電子顕微鏡で観察した。透過型電子顕微鏡でエクソソームを観察し、ウエスタンブロットで全タンパク質の発現量を検出した。また、小脳のジンクフィンガータンパク質の発現量を定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応により測定した。細胞のＴＭＺの５０％阻害濃度（ＩＣ）、アポトーシスおよび浸潤は、それぞれメチルチアゾリルテトラゾリウム（ＭＴＴＴ）、フローサイトメトリーおよびトランスウェルアッセイによって決定した。またはの間の相関は、デュアルレポータールシフェラーゼおよびRNA免疫沈降（RIP）アッセイによって同定された。の効果を調べるために、異種移植モデルを構築した。 .はTMZ耐性グリオーマ細胞およびそのエクソソームで明らかに増加し、TMZ耐性グリオーマでは発現が低下した。また、ノックダウンは TMZ の IC、細胞浸潤、TMZ 抵抗性、アポトーシスを阻害したが、抗 miR-421 をトランスフェクションすることでこれらの効果は逆転した。さらに重要なことは、エクソソソームが枯渇することで、腫瘍の増殖が抑制されたことである。 エクソソソームは、TMZ耐性グリオーマにおいて、軸を調節することで細胞の進行とTMZ耐性を促進する可能性があると考えられた。

The resistance of glioma patients to temozolomide (TMZ) treatment is a limiting factor in clinical treatment. Circular RNA HIPK3 () was found to be highly expressed in glioma, however, the role and potential mechanism of exosomal from TMZ-resistant cells remain poorly unclear. Exosomes were characterized by transmission electron microscopy. The levels of all protein were detected by western blot. Expression levels of , microRNA-421 (), and zinc finger protein of the cerebellum 5 () were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. The cell's 50% inhibitory concentration (IC) of TMZ, apoptosis, and invasion were determined by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT), flow cytometry, and Transwell assays, respectively. The correlation between and or was identified by dual-reporter luciferase and RNA immunoprecipitation (RIP) assays. The xenograft model was established to explore the effect of . was obviously increased in TMZ-resistant glioma cells and their exosomes, , was downregulated in TMZ-resistant glioma. directly targeted and their expressions were negatively correlated in glioma tissues. Besides, knockdown hampered the IC of TMZ, cell invasion, TMZ resistance, and triggered cell apoptosis, whereas these effects were reversed by transfection of anti-miR-421. was the target of and overexpression weakened the inhibition effects of on cell progression and TMZ resistance. More importantly, depletion inhibited tumor growth by decreasing through sponging . Exosomal could promote cell progression and TMZ resistance by regulating axis in TMZ-resistant glioma.