サリノマイシンで処理した石川県子宮内膜癌細胞株におけるVEGF-A-DおよびVEGFR-1-3発現の変異と抗血管新生・リンパ管新生効果の評価

Evaluation of Variances in VEGF-A-D and VEGFR-1-3 Expression in the Ishikawa Endometrial Cancer Cell Line Treated with Salinomycin and An-ti-Angiogenic/Lymphangiogenic Effect.

• Piotr Kras
• Karol Talkowski
• Beniamin Oskar Grabarek
• Nina Dziobek
• Dariusz Boroń
• Marcin Oplawski

抄録

背景:

癌では、転移の過程で重要な役割を果たす新しい血液やリンパ管が過剰かつ制御されずに作られる過程が観察される。血管内皮増殖因子（VEGF-A,-B,-C,-D）ファミリーは、それらの特異的な受容体（VEGFR-1,-2,-3）とともに、これらのプロセスで重要な役割を果たしており、したがって、それらの発現の正しいパターンを決定することは合理的であろう。

BACKGROUND: In cancer, an excessive and uncontrolled process of creating new blood and lymphatic vessels that play a key role in the metastasis process can be observed. The vascular endothelial growth factor (VEGF-A,-B,-C,-D) family together with their specific receptors (VEGFR-1,-2,-3) plays a key role in these processes, therefore it would be reasonable to determine the correct pattern of their expression.

目的:

本研究は、サリノマイシンを用いた石川県子宮内膜癌細胞の治療期間に応じたVEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3の発現パターンの変化を対照培養と比較して検討することにより、サリノマイシンの子宮内膜癌期間中の抗血管新生・抗リンパ管新生薬としての使用性を評価することを目的としている。

OBJECTIVE: The study aimed to assess the use of salinomycin as an anti-angiogenic and anti-lymphangiogenic drug during endometrial cancer by examining changes in the expression pattern of VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3 depending on the treatment period of the Ishikawa endometrial cancer cells with salinomycin in comparison to the control culture.

材料および方法:

サリノマイシンが両mRNAの発現にどのような影響を及ぼすかを決定するために、1μMの薬剤を細胞培養物に添加し、12,24,48時間の間、一斉に培養した。対照培養を構成する細胞は、サリノマイシンで処理しなかった。選択された遺伝子の発現プロファイルの変化を決定するために、マイクロアレイを使用した。RTqPCRおよびELISAを用いた（p<0.05）。

MATERIALS AND METHODS: To determine how influential salinomycin was on the expression of both mRNAs, 1 µM of the drug was added to the cell culture and then it was cultured all together for 12,24 and 48 hour periods. The cells that made up the control culture were not treated with salinomycin. To determine the changes in the expression profile of the selected genes we used the microarray, techniques: RTqPCR and ELISA (p<0.05).

結果:

VEGF-A-D のすべてのアイソフォームと VEGFR-1-3 の受容体について、サリノマイシンの影響下で発現が減少した。VEGF-AおよびVEGFR-1については、サリノマイシンで処理した培養物と対照との間の発現の差は統計的に有意であった（p=0.0004）。一方、VEGF-Bについては、24時間曝露した培養物を対照と比較した場合（p=0.00000）と、H48 vs Cを比較した場合（p=0.00000）との差が統計的に有意であった。VEGF-C、VEGFR-2、VEGFR-3に関しては、統計解析の結果、対照と比較して12,24,48時間培養した培養物と、選択した時間の間の発現の有意な差が示された。これらのすべての比較について、p=0.00000を利用した。

RESULTS: For all isoforms of VEGF-A-D as well as receptors of VEGFR-1-3, a decrease in expression under the influence of salinomycin was noted. For VEGF-A and VEGFR-1, the difference in the expression between the culture treated with salinomycin in comparison to the control was statistically significant (p=0.0004). In turn for VEGF-B, the difference between the culture exposed for 24 hours in comparison to the control (p=0.00000) as well as the comparison between H48 vs C (p=0.00000) was statistically significant. In reference to VEGF-C, VEGFR-2, VEGFR-3 the statistical analysis showed the significant difference in expression between the culture incubated with the drug for 12,24 and 48 hours in comparison to the control as well as between the selected times. For all of these comparisons, p=0.00000 was utilized.

結論:

サリノマイシンは子宮内膜癌細胞におけるVEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3の発現パターンを変化させた。これらの結果から、サリノマイシンはVEGFシグナル伝達経路を介して効果を発揮する可能性が示唆された。

CONCLUSIONS: Salinomycin changes the expression pattern of VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGFR-1, VEGFR-2, and VEGFR-3 in endometrial cancer cells. The obtained results suggest that salinomycin might exert the effect via VEGF signaling pathways.

Copyright© Bentham Science Publishers; For any queries, please email at epub@benthamscience.net.