血清学的抗原としての組換えエプスタインバーウイルス糖タンパク質350

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J. Virol. Methods.2020 Jul;:113927. S0166-0934(20)30179-8. doi: 10.1016/j.jviromet.2020.113927.Epub 2020-07-07.

血清学的抗原としての組換えエプスタインバーウイルス糖タンパク質350

Recombinant Epstein-Barr virus glycoprotein 350 as a serological antigen.

Linn Persson Berg
Elisabeth Thomsson
Gentiana Hasi
Malin Bäckström
Tomas Bergström

PMID: 32650039 DOI: 10.1016/j.jviromet.2020.113927.

抄録

エプスタインバーウイルス（EBV）糖タンパク質350（gp350）は、EBVエンベロープ上に発現する最も豊富な糖タンパク質であり、中和抗体の主要な標的であり、Bリンパ球へのウイルス付着にも不可欠である。いくつかの研究では、ワクチン候補としてEBV gp350が取り上げられていますが、血清学的アッセイのための潜在的な抗原としてはあまり注目されていません。本研究の目的は、以前にEBVに感染した人のEBV gp350特異的IgGを定量する診断ツールを開発することであった。EBV gp350 の細胞外ドメイン（アミノ酸（aa）1-860）をコードするコンストラクトをチャイニーズハムスター卵巣細胞で発現させるために開発した。ウイルス性キャプシド抗原（VCA）およびエプスタインバー核抗原1（EBNA1）に対するIgGの血清ステータスが既知の血清サンプル（n=360）を、その血清ステータスの違いに基づいて3つのグループに分けた。VCA+EBNA1+（n=120）、VCA+EBNA1-（n=120）、VCA-EBNA1-（n=120）の3群に分けた。サンプルは、組換えEBV gp350 aa 1-860を抗原として用いた間接ELISAで分析した。120個のVCA+EBNA1+サンプルのうち108個の明らかな大部分は、検出可能なEBV gp350特異的IgGを有していた。120個のVCA+EBNA1-サンプルのうち、79個が検出可能なEBV gp350特異的IgGを有していた。VCA+EBNA1-サンプル120例中、検出可能なEBV gp350特異的IgGを有していたのは2例のみであった。以上の結果から，EBV gp350 aa 1-860 ELISA は血清中の EBV 特異的 IgG の検出に有用であることが示唆された．

Epstein-Barr virus (EBV) glycoprotein 350 (gp350) is the most abundant glycoprotein expressed on the EBV envelope, the major target for neutralizing antibodies and also essential for virion attachment to B lymphocytes. Several studies have addressed EBV gp350 as a vaccine candidate, but less commonly as a potential antigen for serological assays. The aim of the current study was to develop a diagnostic tool to quantify EBV gp350-specific IgG in previously EBV-infected individuals. A construct encoding the extracellular domain of EBV gp350 (amino acid (aa) 1-860) was developed for expression in Chinese hamster ovary cells. Serum samples (n = 360) with known IgG serostatus against viral capsid antigen (VCA) and Epstein-Barr nuclear antigen 1 (EBNA1) were divided into three groups based on the differences in their serostatus: VCA + EBNA1+ (n = 120), VCA + EBNA1- (n = 120) and VCA-EBNA1- (n = 120). The samples were analyzed by indirect ELISA using recombinant EBV gp350 aa 1-860 as antigen. A clear majority, 108 of the 120 VCA + EBNA1+ samples, had detectable EBV gp350-specific IgG. Of the 120 VCA + EBNA1- samples, 79 had detectable EBV gp350-specific IgG. Only 2 of the 120 VCA-EBNA1- samples had detectable EBV gp350-specific IgG. The results reported here show that use of the EBV gp350 aa 1-860 ELISA can serve as a sensitive method for EBV-specific IgG detection in serum samples.