(+)-リモネン・エポキシドの非臨床毒性と神経疾患に対する生理薬理学的特性

Non-clinical toxicity of (+)-limonene epoxide and its physio-pharmacological properties on neurological disorders.

• Antonia Amanda Cardoso de Almeida
• José Roberto de Oliveira Ferreira
• Rusbene Bruno Fonseca de Carvalho
• Marcia Dos Santos Rizzo
• Luciano da Silva Lopes
• Dalton Dittz
• João Marcelo de Castro E Souza
• Paulo Michel Pinheiro Ferreira

抄録

化合物(+)-リモネンエポキシドは、抗酸化作用、抗不安作用、抗蠕虫作用を有する。しかし，その長期暴露についての調査は行われていなかった。我々は、マウスを用いて(+)-リモネンエポキシドの慢性暴露後の全身毒性プロファイル、抗うつ性、抗てんかん性を検討した。まず、マウスの赤血球および末梢血単核細胞(PBMC)に対する細胞毒性を評価し、その後、マウスに(+)-リモネンエポキシドを投与し、慢性暴露後の全身毒性を調べた。その後、マウスを(+)-リモネンエポキシド（25、50、75mg/kg/日）で120日間経口投与し、この曝露を病態生理学的測定で評価した。抗うつ剤および抗けいれん剤の分析のために、強制水泳および尾部懸濁プロトコル、およびペンチレンテトラゾールおよびピクロトキシン誘発性発作をそれぞれ行った。(+)-リモネンエポキシドのLC値は318.7μg/mLであり，高濃度では赤血球溶解を起こしたが，PMBCには細胞毒性を示さず，血漿中濃度が100μg/mLを超えなければ薬理学的に安全であることが示唆された。また，75mg/kg/日では肝壊死，炎症性浸潤，核酸分解が認められたが，巨視的，血液学的，臨床化学的，栄養学的変化は認められなかった。本剤は、主に75mg/kgで、ペンチレンテトラゾールおよびピクロトキシン誘発性発作の発現を抑制し、死亡数を減少させ、不動時間を減少させた。また、レセルピンの効果を逆転させたことから、抗うつ作用はセロトニンやアドレナリンの伝達に関連している可能性が示唆された。また，(+)-リモネンエポキシドはベンゾジアゼピン様の抗痙攣作用を有している可能性があり，中枢性抗うつ薬による中毒の解毒薬としても推奨される可能性がある。

The compound (+)-limonene epoxide has antioxidant, anxiolytic, and antihelminthic properties. However, investigations to determine its long-term exposure were not performed. We investigated the systemic toxicological profile after chronic exposure as well as the antidepressant and antiepileptic potentialities of (+)-limonene epoxide on mice. Initially, we evaluated acute toxicity on Artemia salina nauplii and cytotoxicity on mice erythrocytes and peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Aftterwards, mice were chronically treated for 120 days by gavage with (+)-limonene epoxide (25, 50, and 75 mg/kg/day) and this exposure was assessed by pathophysiological measurements. For antidepressant and anticonvulsivant analysis, we performed the forced swimming and tail suspension protocols and pentylenetetrazol- and picrotoxin-induced seizures, respectively. (+)-Limonene epoxide showed a LC value of 318.7 μg/mL on A. salina shrimps, caused lysis of red blood cells at higher concentrations only but did not show cytotoxicity on PMBC, which suggests pharmacological safety if plasma concentrations do not exceed 100 μg/mL. Macroscopic, hematological, clinical chemistry, and nutritional changes were not detected, though focal areas of hepatic necrosis, inflammatory infiltrate, and karyolysis have been detected at 75 mg/kg/day. The compound inhibited the developing of pentylenetetrazol- and picrotoxin-induced seizures, decreased deaths, and reduced immobility times, mainly at 75 mg/kg. So, it reversed reserpine effects, suggesting antidepressant effects should be linked to serotonergic and/or adrenergic transmission. It is feasible that (+)-limonene epoxide plays a benzodiazepine-like anticonvulsive action and may be also recommended as an antidote for poisonings caused by central depressants.