外膜ベシクルワクチンの調製法の開発。調製法が保護効果に及ぼす影響．

Development of Different Methods for Preparing Outer Membrane Vesicles Vaccine: Impact of Preparation Method on Protective Efficacy.

• Sun Li
• Da-Qun Chen
• Lu Ji
• Si Sun
• Zhe Jin
• Zi-Li Jin
• Hong-Wu Sun
• Hao Zeng
• Wei-Jun Zhang
• Dong-Shui Lu
• Ping Luo
• An-Ni Zhao
• Jiao Luo
• Quan-Ming Zou
• Hai-Bo Li

抄録

()は、多剤耐性菌や汎薬剤耐性菌の出現により、世界的に共通の懸念事項となりつつあります。耐性病原体に対するワクチンを開発することで抗菌薬耐性の問題に立ち向かうことは、一般的な戦略になりつつある。本研究では，培養上清から自然放出型AbOMV（sOMV）を抽出し，細菌細胞からSuOMV（スクロース抽出型AbOMV）およびnOMV（ネイティブAbOMV）を調製した．3種類のAbOMVは、収量、粒子径、タンパク質組成、LPS/DNA含有量に有意な差を示した。3種類のAbOMVの防御効果を比較するために、マウスのグループにそれぞれのAbOMVを筋肉内または鼻腔内で免疫した。その結果、いずれの方法でも致死的および亜致死的課題に対して有意な保護効果が得られた。さらに、経鼻接種はより強固な防御を示したが、これは粘膜部位において有意なsIgA応答が誘導されたためであると考えられる。3種類のAbOMVの中で，SuOMVは，筋肉内接種でも経鼻接種でも，感染に対する防御免疫が最も高いレベルで誘発され，最も深い特異的な血清IgGまたは粘膜のsIgAの発現によって特徴づけられた．以上のことから、調製方法は、AbOMVの収量、形態および組成に大きな影響を与え、それは感染に対する保護効果にさらに影響を与えた。

() is becoming a common global concern due to the emergence of multi-drug or pan-drug resistant strains. Confronting the issue of antimicrobial resistance by developing vaccines against the resistant pathogen is becoming a common strategy. In this study, different methods for preparing outer membrane vesicles (AbOMVs) vaccines were developed. sOMV (spontaneously released AbOMV) was extracted from the culture supernatant, while SuOMV (sucrose-extracted AbOMV) and nOMV (native AbOMV) were prepared from the bacterial cells. Three AbOMVs exhibited significant differences in yield, particle size, protein composition, and LPS/DNA content. To compare the protective efficacy of the three AbOMVs, groups of mice were immunized either intramuscularly or intranasally with each AbOMV. Vaccination via both routes conferred significant protection against lethal and sub-lethal challenge. Moreover, intranasal vaccination provided more robust protection, which may be attributed to the induction of significant sIgA response in mucosal sites. Among the three AbOMVs, SuOMV elicited the highest level of protective immunity against infection, whether intramuscular or intranasal immunization, which was characterized by the expression of the most profound specific serum IgG or mucosal sIgA. Taken together, the preparation method had a significant effect on the yield, morphology, and composition of AbOMVs, that further influenced the protective effect against infection.

Copyright © 2020 Li, Chen, Ji, Sun, Jin, Jin, Sun, Zeng, Zhang, Lu, Luo, Zhao, Luo, Zou and Li.