トリアシルグリセロール（TAG）定量分析のための共有結合ランダム化標準物質としての脂肪酸センティネル

Fatty acid sentinels as covalently bound randomization standards for triacylglycerol (TAG) quantitative analysis.

• Dong Hao Wang
• Zhen Wang
• Secilia Martinez
• Herbert J Tobias
• J Thomas Brenna

抄録

理由:

トリアシルグリセロール（TAG）の定量分析は、標準の欠如とグリセロ脂質のコンビナトリアルな性質のために存在する可能性があります潜在的なTAG分子種の膨大な数によって妨げられている。アシル基のランダム化により、脂肪酸プロファイルから予測可能なプロファイルを持つTAG混合物が得られますが、検量線混合物としての使用は限られています。

RATIONALE: Quantitative analysis of triacylglycerols (TAG) is impeded by a lack of standards and the huge number of potential TAG molecular species that may be present due to the combinatorial nature of glycerolipids. Randomization of acyl groups yields TAG mixtures with profiles predictable from fatty acid profiles; however, their use as calibration mixtures has been limited.

方法:

ここでは、ランダム化が完全であることの検証を可能にするために、ランダム化の前に定量的に添加し、内部標準として使用することができる脂肪酸同位体センティネルの原理を紹介する。2つの同位体標識脂肪酸メチルエステル（FAME）の混合物を2:1の比率で調製し、正確な比率をGC-FIDで慎重に測定し、TAG混合物のアシル基に共有結合的にランダム化した。

METHODS: We introduce here the principle of fatty acid isotopic sentinels that are quantitatively added prior to randomization to enable verification that randomization is complete, and that can be used as internal standards. A mixture of two isotopically labeled fatty acid methyl esters (FAME) is prepared at a ratio of 2:1 and the exact ratio was carefully measured by GC-FID and randomized covalently into the acyl groups of TAG mixtures.

結果:

触媒量のNaOCHとの反応により、生成物であるFAMEとTAGが同じ脂肪酸プロファイルを持つような完全なランダム化が得られます。TAG混合物の分析により、同位体センティネルがTAG分子種に共有結合的に組み込まれていることが明らかになり、予想された割合からの偏差が1%未満で、実験誤差の範囲内でランダム化が確認されました。

RESULTS: Reaction with catalytic amounts of NaOCH yields complete randomization, such that the product FAME and TAG have the same fatty acid profile. TAG mixture analysis reveals that the isotopic sentinels have been covalently incorporated into the TAG molecular species at <1% deviation from the expected proportions, thus verifying randomization within experimental error.

結論:

センチネルの原理は、共有結合的に組み込まれた内部標準としてここで実証され、ランダム化化学が完了したことを証明しています。これは、定量的な標準のためのコンビナトリアルケミストリーの使用に一般的に適用されます。

CONCLUSIONS: The sentinel principle demonstrated here as covalently incorporated internal standards verifies that randomization chemistry went to completion. It applies in general to use of combinatorial chemistry for quantitative standards.

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