霊長類細胞株の変形翼ウイルス感染

Infection of a Lepidopteran Cell Line with Deformed Wing Virus.

• Tal Erez
• Nor Chejanovsky

抄録

ミツバチウイルス感染を研究するための信頼性の高い細胞培養系の開発は、これまでに多くの試みがなされてきたが、これには大きな困難があった。我々は、異種昆虫由来の細胞株がミツバチウイルスの感染を維持する能力を調査した。この目的のために、我々はキイロハナバチ血球細胞株(P1)をDeformed wing virus (DWV)に感染させた。その結果、DWVのゲノムコピーは感染時に増加し、定量的RT-PCRによってモニターされた。さらに、タグ付きプライマーを用いたRT-PCR解析では、細胞内にDWVのネガティブセンスRNAが存在し、ウイルスの複製を示唆していた。しかし、感染した細胞からのDWVは、P1細胞への感染性が軽度であった。蛹にウイルスを注入した場合も同様の結果が得られた。このように、感染細胞からのウイルス収率は非常に低いように見えたが、我々は初めてDWVが異種細胞株で複製できることを示した。他の多くの昆虫細胞株が利用可能であることを考えると、この研究は将来的にこの方向の研究に道を開くものである。適切な細胞株がない場合、ミツバチウイルスの感染を可能にする代替細胞株の能力を探求することは、細胞レベルでのウイルス感染サイクルを研究・理解する手段を提供し、これらのウイルスの精製単離体の入手を容易にする可能性があります。

Many attempts to develop a reliable cell cultured-based system to study honey bee virus infections have encountered substantial difficulties. We investigated the ability of a cell line from a heterologous insect to sustain infection by a honey bee virus. For this purpose, we infected the Lepidopteran hemocytic cell line (P1) with Deformed wing virus (DWV). The genomic copies of DWV increased upon infection, as monitored by quantitative RT-PCR. Moreover, a tagged-primer-based RT-PCR analysis showed the presence of DWV negative-sense RNA in the cells, indicating virus replication. However, the DWV from infected cells was mildly infectious to P1 cells. Similar results were obtained when the virus was injected into pupae. Thus, though the virus yields from the infected cells appeared to be very low, we show for the first time that DWV can replicate in a heterologous cell line. Given the availability of many other insect cell lines, our study paves the way for future exploration in this direction. In the absence of adequate cell lines, exploring the ability of alternative cell lines to enable honey bee virus infections could provide the means to study and understand the viral infectious cycle at the cellular level and facilitate obtaining purified isolates of these viruses.