加齢は、歯根膜幹細胞の免疫抑制に対する末梢血単核球の応答性に影響を与えた

Aging affects responsiveness of peripheral blood mononuclear cells to immunosuppression of periodontal ligament stem cells.

• Xiaoyu Li
• Bowen Zhang
• Hong Wang
• Xiaolu Zhao
• Zijie Zhang
• Gang Ding
• Fulan Wei

抄録

目的:

ヒト歯根膜幹細胞（hPDLSCs）によって誘導される免疫抑制に対する末梢血単核細胞（PBMCs）の応答に対する年齢の影響は不明である。また、PBMC免疫応答を誘導するのに最も効果的なサイトカインの正体も不明である。本研究では、hPDLSCとの共培養後のPBMCの免疫表現型、増殖、活性化、サイトカイン分泌能に及ぼす年齢の影響を調べた。

OBJECTIVES: The effect of age on the response of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) to immunosuppression induced by human periodontal ligament stem cells (hPDLSCs) is unclear. The identity of the cytokines most effective in inducing the PBMC immune response remains unknown. This study investigated the effects of age on immunophenotype, proliferation, activation, and cytokine secretion capacities of PBMCs following co-culture with hPDLSCs.

方法:

若年者（16～19歳）および高齢者（45～55歳）のドナーからPBMCを採取し、確認されたhPDLSCと様々な期間共培養した。Tリンパ球増殖および細胞表面マーカー発現をフローサイトメトリーで解析した。サイトカイン発現レベルは、定量的ポリメラーゼ連鎖反応アッセイおよび酵素結合免疫吸着アッセイにより測定した。

METHODS: PBMCs were collected from younger (16-19 years) and older (45-55 years) donors, then co-cultured with confirmed hPDLSCs for various lengths of time. T lymphocyte proliferation and cell surface marker expression were analyzed by flow cytometry. Cytokine expression levels were measured by quantitative polymerase chain reaction assays and enzyme-linked immunosorbent assays.

結果:

その結果、Tリンパ球のCD28発現は年齢とともに減少し、増殖が低下したことを示し、CD95発現は年齢とともに増加し、アポトーシスが亢進したことを示した。さらに、hPDLSCは両年齢群でTリンパ球の増殖を抑制した；この抑制は若いドナーの細胞よりも高齢のドナーの細胞の方が強かった。年齢はインターロイキン-2とインターフェロン-γの分泌を減少させたが、hPDLSCで培養したPBMCsは腫瘍壊死因子-βの分泌を増加させた。

RESULTS: CD28 expression by T lymphocytes decreased with age, indicating reduced proliferation; CD95 expression increased with age, indicating enhanced apoptosis. Moreover, hPDLSCs inhibited T lymphocyte proliferation in both age groups; this inhibition was stronger in cells from older donors than in cells from younger donors. Age reduced the secretion of interleukin-2 and interferon-γ, whereas it increased the secretion of tumor necrosis factor-β by PBMCs cultured with hPDLSCs.

結論:

加齢は、hPDLSC誘導免疫抑制に対するPBMCの応答に頑健な影響を与えている可能性がある。

CONCLUSIONS: Aging may have a robust effect on the response of PBMCs towards hPDLSC-induced immunosuppression.