プロトロンビンは、ヒトの高度糖化エンドプロダクト受容体の結合パートナーです

Prothrombin is a binding partner of the human Receptor of Advanced Glycation End products.

• Genny Degani
• Alessandra Altomare
• Stefania Digiovanni
• Beatrice Arosio
• Güenter Fritz
• Angela Raucci
• Giancarlo Aldini
• Laura Popolo

抄録

高度糖化最終産物受容体（RAGE）は、哺乳類の生理学、および炎症性疾患や酸化ストレスに基づく疾患の病因と進行において重要な役割を果たしています。成人では、RAGEの発現は通常、肺胞I型上皮細胞の基底膜に集中している肺のみで高くなっています。疾患では、患部組織でRAGEレベルが上昇し、慢性炎症を持続させます。RAGEは、エクトドメイン、膜貫通らせん、短いカルボキシル末端尾を持つ膜糖タンパク質として存在するか、またはデコイ受容体（sRAGE）として作用する可溶性エクトドメインとして存在する。VC1ドメインは、高度糖化最終生成物（AGE）、S100タンパク質、HMGB1を含む大多数のRAGEリガンドとの結合に関与している。他のリガンドが存在するかどうかを確認するために、ヒト血漿からVC1によってプルダウンされた物質をMSで解析した。295個の同定されたタンパク質のうち20個が選択され、凝固・補体プロセスと細胞外マトリックスに関連していた。そのうち4つはγ-カルボキシルグルタミン酸(Gla)ドメイン、カルシウム結合モジュールを含み、プロトロンビン(PT)が最も多く含まれていた。MicroScale Thermophoresisを用いて、競合相手として作用するカルシウムの非存在下または存在下でのPTとVC1およびsRAGEとの相互作用を定量化した。Glaドメインを欠いたPT（PT des-Gla）はsRAGEと結合しなかったが、Glaドメインが相互作用に重要であることを示す更なる証拠を提供する。最後に、VC1の存在は用量依存的に血漿凝固を遅延させた。我々は、RAGEが、おそらく肺損傷の条件下で血液凝固の調節に関与していることを提案する。

The receptor for advanced glycation end products (RAGE) plays a key role in mammal physiology and in the etiology and progression of inflammatory and oxidative stress-based diseases. In adults, RAGE expression is normally high only in the lung where the protein concentrates in the basal membrane of alveolar Type I epithelial cells. In diseases, RAGE levels increase in the affected tissues and sustain chronic inflammation. RAGE exists as a membrane glycoprotein with an ectodomain, a transmembrane helix and a short carboxyl-terminal tail, or as a soluble ectodomain that acts as a decoy receptor (sRAGE). VC1 domain is responsible for binding to the majority of RAGE ligands including advanced glycation end products (AGEs), S100 proteins and HMGB1. To ascertain whether other ligands exist, we analyzed by MS the material pulled-down by VC1 from human plasma. Twenty out of 295 identified proteins were selected and associated to coagulation and complement processes and to extracellular matrix. Four of them contained a γ-carboxyl glutamic acid (Gla)-domain, a calcium-binding module, and prothrombin (PT) was the most abundant. Using MicroScale Thermophoresis, we quantified the interaction of PT with VC1 and sRAGE in the absence or presence of calcium that acted as a competitor. PT devoid of the Gla-domain (PT des-Gla) did not bind to sRAGE, providing further evidence that the Gla-domain is critical for the interaction. Finally, the presence of VC1 delayed plasma clotting in a dose-dependent manner. We propose that RAGE is involved in modulating blood coagulation presumably in conditions of lung injury.

Published under license by The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, Inc.