circ-DENND4CはTCF4の発現を上昇させ、Wnt/β-カテニンシグナル経路を活性化することで肝細胞癌細胞の増殖とアポトーシスを制御している

Circ-DENND4C up-regulates TCF4 expression to modulate hepatocellular carcinoma cell proliferation and apoptosis via activating Wnt/β-catenin signal pathway.

• Xialei Liu
• Lewei Yang
• Dong Jiang
• Wuzhu Lu
• Yongyu Zhang

抄録

背景:

肝細胞癌（HCC）は中国では一般的な悪性腫瘍である。経カテーテル肝動脈化学塞栓療法（TACE）のような先進的な治療により、多くのHCC患者の延命が図られている。しかし、ほとんどの肝細胞癌患者の予後は満足のいくものではありません。近年、circular RNA（circularRNA）が徐々に明らかになってきており、がんにおいてかなりの機能を発揮するようになってきています。肝細胞癌におけるcircularRNAの有用性は、まだまだ解明されていない。

Background: Hepatocellular carcinoma (HCC) is a common malignant tumor in China. Advanced treatment like transcatheter hepatic arterial chemoembolization (TACE) has prolonged the lives of many HCC patients. However, the prognosis of most HCC patients remains unsatisfactory. Recently, circular RNAs (circRNAs) have been gradually unveiled to exert considerable functions in cancer. Promising circRNAs in HCC remains to be further elucidated.

研究方法:

遺伝子発現はqRT-PCRとウエスタンブロットで評価した。また、circ-DENND4CのHCCにおける機能をin vitroおよびin vivo実験により評価した。また、HCC細胞内でのcirc-DENND4Cの位置は、細胞内分画とFISHアッセイにより決定された。分子間の関連性は、RNAプルダウン、RIPおよびルシフェラーゼレポーターアッセイを用いて解析した。

Methods: Gene expression was assessed by qRT-PCR and western blot. The function of circ-DENND4C in HCC was estimated by both in vitro and in vivo experiments. The location of circ-DENND4C in HCC cells was determined by subcellular fractionation and FISH assays. The association among molecules were analyzed through RNA pull down, RIP and luciferase reporter assays.

研究成果:

乳癌で同定された癌遺伝子であるcirc-DENND4C（DENN domain containing 4C）がHCC細胞で過剰発現していた。また、circ-DENND4Cは、Wnt/β-カテニン経路を活性化することで、HCC細胞においてもプロ腫瘍機能を発揮していた。さらに、circ-DENND4Cは転写因子4(TCF4)の発現を増強し、miR-195-5pを封鎖することでWnt/β-カテニンシグナルを活性化することが明らかになった。さらに、circ-DENND4Cは、miR-195-5pを介してTCF4の発現を上昇させることで、HCC細胞の悪性表現型を制御していることが明らかになった。

Results: circ-DENND4C (DENN domain containing 4C), an oncogene identified in breast cancer, was overexpressed in HCC cells. Also, circ-DENND4C exerted pro-tumor functions in HCC through activating Wnt/β-catenin pathway. Importantly, circ-DENND4C could augment transcription factor 4 (TCF4) expression to activate Wnt/β-catenin signaling via sequestering miR-195-5p. Moreover, following rescue assays disclosed that circ-DENND4C mediated malignant phenotypes in HCC cells via up-regulating TCF4 through sponging miR-195-5p.

結論:

circ-DENND4Cは、Wnt/β-カテニン経路を活性化することでTCF4発現を上昇させ、肝細胞癌細胞の悪性化挙動を制御していることが明らかとなり、肝細胞癌治療の有望なターゲットとなる可能性が示唆された。

Conclusion: circ-DENND4C boosted TCF4 expression to modulate malignant behaviors of HCC cells via activating Wnt/β-catenin pathway, which might offer a promising target for HCC treatment.

© The Author(s) 2020.