RBM20 p.R634W変異を持つ拡張型心筋症患者からの多能性幹細胞株とCRISPR/Cas9改変等原性コントロールの生成

Generation of pluripotent stem cell lines and CRISPR/Cas9 modified isogenic controls from a patient with dilated cardiomyopathy harboring a RBM20 p.R634W mutation.

• Sabine Rebs
• Farbod Sedaghat-Hamedani
• Elham Kayvanpour
• Benjamin Meder
• Katrin Streckfuss-Bömeke

抄録

RNA 結合モチーフ蛋白質 20（RBM20）は、代替スプライシング因子であり、心臓組織で高度に発現している。RBM20のRSドメインの変異は、様々な心筋症を引き起こすことが示されている。本研究では、ヘテロ接合型RBM20変異p.R634Wを有する拡張型心筋症患者から誘導多能性幹細胞（iPSCs）を作製し、CRISPR/Cas9ゲノム編集法を用いて等原性コントロール株を連続的に作製した。患者特異的RBM20 iPSCと等原性対照株は、完全な多能性、ゲノムの完全性、およびin vitro分化能を維持していた。すべてのiPSC株は純粋な心筋細胞に分化することができ、ヒトRBM20が介在する心疾患の病態を研究するための貴重なツールを提供することができた。

RNA binding motif protein 20 (RBM20) is an alternative splicing factor and highly expressed in cardiac tissue. Mutations in the RS domain of RBM20 have been shown to cause different cardiomyopathies. Here, we generated induced pluripotent stem cells (iPSCs) from a dilated cardiomyopathy patient harboring the heterozygous RBM20 mutation p.R634W and consecutively produced isogenic control line using CRISPR/Cas9 genome editing. Patient-specific RBM20 iPSCs and isogenic control line maintained full pluripotency, genomic integrity, and in vitro differentiation capacity. All iPSC-lines were able to differentiate into pure cardiomyocytes, thus providing a valuable tool for studying the pathogenesis of human RBM20-mediated cardiac disease.

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