D-ダイマーとフィブリン分解産物は血小板シグナル伝達を損なう。血漿中のD-ダイマーは外傷時の血小板機能障害の予測因子および媒介因子である

D-Dimer and Fibrin Degradation Products Impair Platelet Signaling: Plasma D-Dimer Is a Predictor and Mediator of Platelet Dysfunction During Trauma.

• Christopher C Verni
• Antonio Davila
• Carrie A Sims
• Scott L Diamond

抄録

背景:

血小板機能障害はしばしば外傷誘発性凝固障害を伴う。可溶性フィブリンは血小板糖タンパク質VI（GPVI）シグナル伝達を障害し、外傷患者の血小板はカルシウム動員障害を示すことがあるため、我々は外傷時の血小板機能障害におけるフィブリノライシスの役割を検討した。

BACKGROUND: Platelet dysfunction often accompanies trauma-induced coagulopathy. Because soluble fibrin impairs platelet glycoprotein VI (GPVI) signaling and platelets of trauma patients can display impaired calcium mobilization, we explored the role of fibrinolysis on platelet dysfunction during trauma.

方法:

トロンビンおよび組織プラスミノーゲンアクチベーター（tPA）で前処理した健康な血小板リッチ血漿（PRP）を用いて、コンブルキシン誘発性GPVIカルシウム動員を調査した。健常者（n=7）と外傷患者（n=22）の血液サンプルを用いて、血小板カルシウム動員、血漿Dダイマー、血小板Dダイマー結合（フローサイトメトリーによる）、血小板ルミアグリゲーションの検査を行った。

METHODS: Convulxin-induced GPVI calcium mobilization was investigated in healthy platelet-rich plasma (PRP) pretreated with thrombin and tissue plasminogen activator (tPA). Blood samples from healthy participants (n = 7) and trauma patients (n = 22) were tested for platelet calcium mobilization, plasma D-dimer, platelet D-dimer binding (via flow cytometry), and platelet lumi-aggregometry.

結果:

健康な血小板については、コンブルキシン刺激の前に、懸濁液中に架橋可溶性フィブリン（tPAなし）または架橋フィブリン分解生成物（FDP）が生成された場合に、最大の血小板機能障害が観察された。フィブリン重合の欠如（Gly-Pro-Arg-Pro[GPRP]によって阻害される）または第XIIIa因子架橋の欠如（T101によって阻害される）はGPVIシグナルを回復させたが、非架橋FDPはコンブルキシンによって誘導されたシグナルを部分的にしか遮断しなかった。さらに、健康なPRPにD-ダイマーを添加すると、様々なアゴニストによって誘導される血小板凝集と密な顆粒放出が阻害された。血漿中のD-ダイマー濃度は、様々なアゴニストによって誘導された血小板カルシウム動員によって測定される血小板機能障害と強い相関関係があった（R=0.8236）。外傷後48～120時間までに血漿中Dダイマー濃度は低下し、血小板機能は有意に増加したが、健康なレベルまでは上昇しなかった。外傷後の血小板はDダイマー結合の上昇を示したが、αIIbβ3阻害剤GR144053によって部分的にしか減少しなかった。60分間のインキュベーション後、外傷患者から血漿中に再懸濁させた健康な血小板を洗浄したところ、血小板あたり約10000D-ダイマー相当量が捕捉された。

RESULTS: For healthy platelets, maximal platelet dysfunction was observed when cross-linked soluble fibrin (no tPA) or cross-linked fibrin degradation products (FDPs) were generated in suspension before convulxin stimulation. Lack of fibrin polymerization (inhibited by Gly-Pro-Arg-Pro [GPRP]) or lack of factor XIIIa cross-linking (T101-inhibited) restored GPVI signaling, whereas non-cross-linked FDPs only partially blocked signaling induced by convulxin. In addition, D-dimer added to healthy PRP impaired platelet aggregation and dense granule release induced by various agonists. Plasma D-dimer level was strongly correlated (R = 0.8236) with platelet dysfunction as measured by platelet calcium mobilization induced with various agonists. By 48 to 120 h after trauma, plasma D-dimer levels declined, and platelet function increased significantly but not to healthy levels. Trauma platelets displayed elevated D-dimer binding that was only partially reduced by αIIbβ3-inhibitor GR144053. After 60-minute incubation, washed healthy platelets resuspended in plasma from trauma patients captured approximately 10 000 D-dimer equivalents per platelet.

結論:

外傷の間、DダイマーとFDPはGPVIとインテグリンαIIbβ3の関与を介して血小板を阻害し、線溶に依存した血小板機能低下の表現型に寄与している。

CONCLUSIONS: During trauma, D-dimer and FDPs inhibit platelets, potentially via GPVI and integrin αIIbβ3 engagement, contributing to a fibrinolysis-dependent platelet loss-of-function phenotype.

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