哺乳類のSIRT4は、癌の増殖、遊走、浸潤を抑制することにより、明確細胞腎癌の腫瘍抑制作用を有することが明らかになった

Mammalian SIRT4 is a tumor suppressor of clear cell renal cell carcinoma by inhibiting cancer proliferation, migration and invasion.

• Changming Wang
• Chiyuan Piao
• Junlong Liu
• Zhe Zhang
• Yuyan Zhu
• Chuize Kong

抄録

目的:

サーチュインファミリーは、クラスIIIのヒストン脱アセチル化酵素（HDAC）と定義されている。近年、哺乳類のサイレント情報調節因子2 4（SIRT4）が複数の癌における腫瘍抑制遺伝子であることが報告されている。本研究の目的は、透明細胞腎細胞癌（ccRCC）におけるSIRT4の潜在的な役割を探ることであった。

OBJECTIVE: Sirtuins family are defined as class III histone deacetylases (HDACs). Recently, mammalian silent information regulator two 4 (SIRT4) has been reported to be a tumor suppressor gene in multiple cancers. The objective of the present study was to explore the potential role of SIRT4 in clear cell renal cell carcinoma (ccRCC).

方法:

ウェスタンブロッティング（WB）、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）、バイオインフォマティクスデータを用いてccRCCとそれに隣接する非腫瘍組織におけるSIRT4の発現レベルを推定し、臨床データと生存期間のデータも収集して解析した。in vitro試験では、ccRCC細胞株をSIRT4-siRNAまたはレンチウイルスでトランスフェクトし、SIRT4の発現レベルをダウンレギュレートまたはオーバーエクスポーズした。次に、腫瘍細胞の増殖能を５-エチニル-２'-デオキシウリジン（ＥＤＵ）アッセイで評価し、細胞移動および浸潤能をトランスウェルアッセイで評価した。

METHODS: We estimated SIRT4 expression levels in ccRCC and its adjacent non-neoplastic tissue by Western blotting (WB), quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and bioinformatics data, the clinical and survival data were also collected and analyzed. In vitro study, ccRCC cell lines were transfected with SIRT4-siRNA or lentivirus to downregulate or overexpress the expression level of SIRT4. Then, the proliferation capacity of tumor cell was assessed by 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EDU) assay, cell migration and invasion capacity were assessed by Transwell assays.

結果:

その結果、ccRCCにおけるSIRT4の発現レベルは、対応する正常組織と比較して有意に低いことが示された（P<0.001）。一方、バイオインフォマティクスデータとWBの結果から、ccRCC患者のSIRT4発現レベルの低さは、明らかに全生存率の低さと進行した腫瘍ステージに関与していることが示された。生物学的実験では、SIRT4 の過剰発現は ccRCC 細胞の増殖、遊走、浸潤能力を有意に低下させることが示された。逆に、SIRT4のダウンレギュレーションはccRCC細胞の増殖、遊走、浸潤能力を高めた。

RESULTS: Our results indicated that the expression level of SIRT4 in ccRCC was significantly lower than the corresponding normal tissues (P< 0.001). Meanwhile, bioinformatics data and the result of WB showed that low SIRT4 expression level was obviously involved with poor overall survival and advanced tumor stage in ccRCC patients. Biological experiments demonstrated that overexpression of SIRT4 significantly reduced the proliferation, migration and invasion ability of ccRCC cells. Conversely, downregulation of SIRT4 enhanced the proliferation, migration and invasion ability of ccRCC cells.

結論:

これらの知見は、SIRT4がccRCCの腫瘍抑制因子として作用し、ccRCCの新たなバイオマーカーおよび治療標的となる可能性を示唆している。

CONCLUSIONS: These findings support that SIRT4 acts as a tumor suppressor in ccRCC and might be a novel biomarker and new therapeutic target for ccRCC.