卵胞上皮における EGFR の局在化とトラフィッキング動態の定量的解析

Quantitative analyses of EGFR localization and trafficking dynamics in the follicular epithelium.

• Nicole T Revaitis
• Matthew G Niepielko
• Robert A Marmion
• Eric A Klein
• Benedetto Piccoli
• Nir Yakoby

抄録

組織内の上皮成長因子受容体（EGFR）の定性と定量のギャップを埋めるために、我々は卵巣、初期胚、および虚核椎間板における以前の報告と一致するEGFRの発現および活性化パターンを持つsfGFPタグ付きEGF受容体（EGFR-sfGFP）を、卵胞上皮細胞内で生成した。ELISA法を用いて、卵胞細胞（FC）あたり平均1100個、6200個、2500個の受容体を、それぞれ卵巣発生の8/9、10、11以上の段階で定量した。興味深いことに、初期段階でのFCの先端側へのEGFRの空間的局在は、TGF-α様リガンドGurkenに依存していた。後の段階では、EGFRはFCの基底側に局在していた。最後に、EGFRのFCにおけるエンドソーム局在を追跡した。EGFRは後期エンドソームと共局在していたが、初期エンドソームとの有意な共局在は認められなかった。EGFR-sfGFPハエは、組織内でのEGFRの細胞内局在化と制御を研究するためのエキサイティングな新しいリソースである。

To bridge the gap between qualitative and quantitative analyses of the epidermal growth factor receptor (EGFR) in tissues, we generated a sfGFP-tagged EGF receptor (EGFR-sfGFP) in The homozygous fly appears wild type with EGFR expression and activation patterns that are consistent with previous reports in the ovary, early embryo, and imaginal discs. Using ELISA, we quantified an average of 1100, 6200, and 2500 receptors per follicle cell (FC) at stages 8/9, 10, and ≥11 of oogenesis, respectively. Interestingly, the spatial localization of the EGFR to the apical side of the FCs at early stages depended on the TGF-alpha-like ligand Gurken. At later stages, EGFR localized to basolateral positions of the FCs. Finally, we followed the endosomal localization of EGFR in the FCs. The EGFR co-localized with the late endosome, but no significant co-localization of the receptor was found with the early endosome. The EGFR-sfGFP fly is an exciting new resource to study cellular localization and regulation of EGFR in tissues.

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