Setaria cerviにおけるHSP14-3-3の同定とW. bancrofti感染ヒト血清との交差反応性

Identification of a HSP14-3-3 in Setaria cervi and its cross-reactivity with W. bancrofti infected human sera.

• Faiyaz Ahmad
• Ranjeet Kumar
• Sarika Gupta
• Sushma Rathaur

抄録

AIM:

フィラリア寄生虫Setaria cerviの29 kDa熱ストレス蛋白質の同定とリンパ系フィラリア症の診断薬としての可能性を評価した。

AIM: Identification of a 29 kDa heat stress protein in filarial parasite Setaria cervi and evaluation of its diagnostic potential against lymphatic filariasis.

方法と結果:

フィラリア寄生虫S. cerviを42℃で2時間培養し、ヒートショック蛋白質（HSP）を誘導した。細胞質抽出物の10% SDS PAGEでは、いくつかの過剰発現バンドが確認された。また、Bm14-3-3-3様タンパク質2の配列をW. bancrofti, Caenorhabditis elegans, Loa loa, Homo sapiensと多重配列アラインメントしたところ、それぞれ100％, 86％, 83％, 78％の配列類似性が認められた。Sc14-3-3タンパク質の抗原性の有効性を異なるフィラリア血清を用いてELISA法で評価したところ、IgG1ではEndemic Normal(EN)＜Microfilaraemic(MF)＜Chronic(CH)、IgG4ではEN＜CH＜MFの順に交差反応性が認められた。CHとMFのIgG1とIgG4の特異的な免疫ブロッティングにより、その特異的な抗原性の交差反応性が明らかになりました。

METHODS AND RESULTS: The Heat shock proteins (HSPs) were induced in filarial parasite S. cervi by incubated at 42 ◦C for 2 hrs. The 10% SDS PAGE of cytosolic extract showed several over-expressed bands. The MALDI LC/MS analysis of 29 kDa band showed 100% similarity with Bm14-3-3 like protein 2. Multiple sequence alignment of Bm14-3-3 like protein 2 sequence with W. bancrofti, Caenorhabditis elegans; Loa loa and Homo sapiens showed 100%, 86%, 83% and 78%, sequence similarity respectively. The antigenic efficacy of Sc14-3-3 protein was evaluated with different filarial sera using ELISA which showed cross reactivity in order to Endemic Normal(EN)<Microfilaraemic(MF)<Chronic(CH) with IgG1 and EN<CH<MF in IgG4 ELISA. IgG1 and IgG4 specific immunoblotting with CH and MF sera further explicated its specific antigenic cross-reactivity.

結論:

S. cerviの29 kDaのヒートショック蛋白質は14-3-3-3蛋白質として同定され，ヒトフィラリア寄生虫B. malayiと100%の相同性を有していた．このタンパク質は、W. bancrofti感染者血清のIgG1およびIgG4サブクラス抗体と強い反応性を示し、14-3-3-3タンパク質がワクチンや診断マーカーとして利用できることを示唆している。

CONCLUSION: A 29 kDa heat shock protein of S. cervi was identified as 14-3-3 protein having 100% homology to human filarial parasite B. malayi. It showed strong reactivity with IgG1 and IgG4 subclass antibodies of W. bancrofti infected human sera suggesting that 14-3-3 protein could be used as a vaccine/ diagnostic marker.

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