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マウス胚盤胞の発現に及ぼす受精とガラス化の干渉効果
Interfering Effects of Fertilization and Vitrification on Expression of and in Mouse Blastocysts.
PMID: 32681622 DOI: 10.22074/ijfs.2020.5984.
抄録
背景:
胚のガラス化は生殖補助技術(ART)の重要な手段です。しかし、体外受精が胚の発生に悪影響を及ぼすことが懸念されています。本研究では、マウス胚盤胞における長鎖非コードRNA(lncRNA)遺伝子トラップ遺伝子座2とその逆転写遺伝子デルタ様ホモログ1の発現に加えて、ガラス化が胚の発生能力に及ぼす影響を評価することを目的としています。
Background: Embryo vitrification is a key instrument in assisted reproductive technologies (ARTs). However, there is increasing concern that vitrification adversely affects embryo development. This study intends to assess the effect of vitrification on developmental competence, in addition to expressions of long non-coding RNA (lncRNA) gene trap locus 2 and its reciprocal imprinted gene delta-like homolog 1 , in mouse blastocysts.
材料と方法:
本実験では、対照群(過昇圧マウスから採取した新鮮な胚盤胞)、受精群(体外受精;体外受精由来の胚盤胞)、ガラス化群(体外受精由来の胚盤胞をガラス化/2細胞段階で温めた胚盤胞)の3つの実験群を設計し、マウス胚盤胞の発現に及ぼす干渉効果について検討した。定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(qRT-PCR)を実施し、胚盤胞の発現レベルおよび胚盤胞中の発現レベルを評価した。
Materials and Methods: In this experimental study, we have designed three experimental groups: control (fresh blastocysts collected from superovulated mice), fertilization (IVF; blastocysts derived from IVF) and vitrification (IVF derived blastocysts subjected to vitrification/warming at the 2-cell stage). Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) was performed to assess the expression levels of and in the blastocysts.
結果:
その結果、ガラス化群は体外受精群と比較して、それぞれ胚盤胞率とふ化率が有意に低かった(P<0.037)、(P<0.041)。体外受精および胚体外受精後、Gtl2はダウンレギュレートされ、Dlk1はアップレギュレートされた(P<0.05)。
Results: The results showed that vitrification group had significantly lower blastocyst and hatching rates compared to the IVF group (P<0.037) and (P<0.041), respectively. Gtl2 was down-regulated and Dlk1 was up-regulated following the IVF and vitrification (P<0.05).
結論:
これらの結果から、体外受精や硝子体化がゲノムインプリンティングやlncRNA遺伝子の発現を阻害し、体外受精児の健康に影響を与える可能性が示唆されました。
Conclusion: These results suggested that IVF and vitrification disturbed genomic imprinting and lncRNA gene expressions, which might affect the health of IVF children.
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