レスベラトロールは、非タンパク質コーディングRNA（DANCR）の発現を阻害することで、ヒト上咽頭癌細胞の成長を抑制する

Resveratrol Suppresses Human Nasopharyngeal Carcinoma Cell Growth Via Inhibiting Differentiation Antagonizing Non-Protein Coding RNA (DANCR) Expression.

• Jiafeng Zhang
• Xiaojie Jin
• Chuan Zhou
• Hui Zhao
• Ping He
• Yalin Hao
• Qiongna Dong

抄録

背景 レスベラトロールは、いくつかの癌において抗癌効果と潜在的な化学療法活性を示すことがわかっているが、上咽頭癌（NPC）におけるレスベラトロールの役割と分子メカニズムはまだ十分に理解されていない。本研究では、NPCの進行におけるレスベラトロールの効果とその分子機構を調べることを目的とした。本研究では、DANCR と PTEN の発現を検出するために、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応とウエスタンブロッティングを用いた。また、MTT アッセイと EdU アッセイを用いて、NPC 細胞の細胞増殖を検出した。細胞遊走に対するレスベラトロールの効果は、Transwell migration assayにより検討した。RNA免疫沈降アッセイとクロマチン免疫沈降アッセイを行い、DANCR、EZH2、PTENの相互作用を調べた。また、NPC細胞のマウス異種移植モデルを樹立し、PTEN発現を検出するために免疫組織化学アッセイを行った。結果 レスベラトロールは NPC 細胞の増殖と遊走を用量依存的に抑制した。さらに、レスベラトロールはDANCRの発現を低下させ、DANCRを過剰発現させると、NPC細胞の遊走に対するレスベラトロールの阻害効果は消失した。また、DANCRはEZH2と結合し、PTENプロモーターへのEZH2の結合を介してPTENの発現を低下させることが示唆された。さらに、レスベラトロールはDANCR/PTEN経路によるNPC細胞の増殖と遊走を抑制することが示唆された。レスベラトロールは有意に腫瘍体積と腫瘍重量を減少させ、PTENの発現を増加させた。結論 レスベラトロールは、PTENの発現を増加させ、DANCRのダウンレギュレーションを介してNPC細胞の成長と遊走を抑制した。

BACKGROUND Although resveratrol has been found to show anti-cancer effects and potential chemotherapeutic activities in several cancers, the role and molecular mechanisms of resveratrol in nasopharyngeal carcinoma (NPC) remains poorly understood. This study aimed to investigate the effect of resveratrol in NPC progression and its molecular mechanism. MATERIAL AND METHODS Quantitative real-time polymerase chain reaction and western blotting were used to detect the expression of DANCR and PTEN. MTT assay and EdU assay were performed to detect the cell proliferation in NPC cells with different treatment. The effect of resveratrol on cell migration was explored by Transwell migration assay. RNA immunoprecipitation assay and chromatin immunoprecipitation assay were performed to test the interaction between DANCR, EZH2, and PTEN. A mouse xenograft model of NPC cell was established, and immunohistochemistry assay was performed to detect the PTEN expression. RESULTS Resveratrol treatment inhibited NPC cell growth and migration in a dose-dependent manner. Additionally, resveratrol downregulated the expression of DANCR and DANCR overexpressing abrogated the inhibition effect of resveratrol on NPC cell migration. Mechanistically, DANCR could bind to EZH2 and downregulated PTEN expression through mediating the binding of EZH2 on PTEN promoter. Furthermore, rescue experiments suggested resveratrol inhibited NPC cell growth and migration by the DANCR/PTEN pathway. Resveratrol significantly decreased the tumor volume and tumor weight and increased the expression of PTEN. CONCLUSIONS Resveratrol increased PTEN expression and suppressed NPC cell growth and migration through downregulation of DANCR.