環状RNA hsa_circ_0005909はmiR-936/HMGB1軸を介して骨肉腫の進行を調節している

Circular RNA hsa_circ_0005909 modulates osteosarcoma progression via the miR-936/HMGB1 axis.

• Shuai Ding
• Guangquan Zhang
• Yanzheng Gao
• Shulian Chen
• Chen Cao

抄録

背景:

骨肉腫（OS）は、小児、青年、青年期に最も一般的な骨悪性腫瘍である。環状RNA hsa_circ_0005909（circ_0005909）は、OSの進行に関与している。それにもかかわらず、circ_0005909のOSにおける役割やメカニズムについての報告は少ない。

Background: Osteosarcoma (OS) is the most common bone malignant tumor in children, youth, and adolescents. Circular RNA hsa_circ_0005909 (circ_0005909) is involved in the progression of OS. Nevertheless, there are few reports on the role and mechanism of circ_0005909 in OS.

方法:

定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）を行い、骨肉腫組織および細胞におけるcirc_0005909、miR-936、および高可動性グループボックス1（HMGB1）mRNAの発現を調べた。細胞生存率、コロニー形成、遊走および浸潤は、Cell Counting Kit-8（CCK-8）、細胞コロニー形成、またはトランスウェルアッセイによって評価した。細胞上皮間葉転換（ＥＭＴ）およびＨＭＧＢ１タンパク質レベルは、ウエスタンブロット分析により評価した。circ_0005909のin vivoでの腫瘍成長における役割は、異種移植アッセイによって検証された。circ_0005909またはHMGB1とmiR-936の関係は、デュアルルシフェラーゼレポーターまたはRNAプルダウンアッセイで確認した。

Methods: Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was executed to examine the expression of circ_0005909, miR-936, and High Mobility Group Box 1 (HMGB1) mRNA in OS tissues and cells. Cell viability, colony formation, migration, and invasion were evaluated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8), cell colony formation, or transwell assays. Cell epithelial-mesenchymal transition (EMT) and HMGB1 protein levels were assessed through western blot analysis. The role of circ_0005909 on tumor growth in vivo was verified by xenograft assay. The relationship between circ_0005909 or HMGB1 and miR-936 was confirmed with the dual-luciferase reporter or RNA pull-down assays.

結果:

Circ_0005909の発現量は、OSの組織や細胞でアップレギュレーションされていた。circ_0005909発現が高いOS患者は生存率が低かった。circ_0005909の阻害はin vivoでの腫瘍増殖を抑制し、in vitroではOS細胞の細胞生存率、コロニー形成、遊走、浸潤およびEMTを抑制した。さらに、circ_0005909はmiR-936のスポンジの役割を果たし、circ_0005909のサイレンシングがOS細胞の悪性化行動に与える抑制効果はmiR-936阻害剤によって消失した。また、HMGB1はmiR-936の標的として作用し、miR-936を介してcirc_0005909によって制御されていた。さらに、HMGB1 の過剰発現は、circ_0005909 の抑制を介して OS 細胞の悪性化行動に対する抑制効果を回復させた。

Results: Circ_0005909 level was upregulated in OS tissues and cells. OS patients with high circ_0005909 expression had a lower survival rate. Circ_0005909 inhibition reduced tumor growth in vivo and constrained cell viability, colony formation, migration, invasion, and EMT of OS cells in vitro. Furthermore, circ_0005909 served as a sponge for miR-936 and the repressive impacts of circ_0005909 silencing on malignant behaviors of OS cells were abolished by miR-936 inhibitors. Also, HMGB1 acted as a target for miR-936 and was modulated by circ_0005909 via miR-936. Additionally, HMGB1 overexpression restored the inhibitory influence on the malignant behaviors of OS cells mediated by circ_0005909 inhibition.

結論:

Circ_0005909の阻害は、miR-936をスポンギングしてHMGB1をダウンレギュレーションすることでOSの進行を阻害した。

Conclusions: Circ_0005909 inhibition impeded the progression of OS via downregulating HMGB1 via sponging miR-936.

© The Author(s) 2020.