in vitroおよびin vivo（G. mellonella）アプローチを用いたLactobacillus reuteriと歯周病原性細菌との相互作用

Interaction between Lactobacillus reuteri and periodontopathogenic bacteria using in vitro and in vivo (G. mellonella) approaches.

• Thaís Aguiar Santos
• Liliana Scorzoni
• Raquel Correia
• Juliana Campos Junqueira
• Ana Lia Anbinder

抄録

歯周炎は多因子性の炎症性疾患であり、成人の歯を失う主な原因となっている。その治療法として、ラクトバチルス・ロイテリなどのプロバイオティクスの使用を含む新しい治療法が提案されている。本研究の目的は、L. reuteriの抗菌効果を評価することである：ライブ、ヒートキル、培養濾液（無細胞上清）、in vitroでの歯周病原性細菌（Fusobacterium nucleatumとAggregatibacter actinomycetemcomitans）、およびGalleria mellonellaを用いたin vivo生存曲線、血球密度、微生物の回復を評価することである。in vitro試験では、すべての製剤はF. nucleatumのコロニー形成単位を減少させたが、生きたL. reuteriのみがA. actinomycetemcomitansの成長を減少させた。すべての処理は、インビボでの歯周病原性細菌の増殖を減少させた。上清を用いた処理は、生きたL.ロイテリを用いた処理よりもF. nucleatumに感染した幼虫の生存率を高め、どの処理もA. actinomycetemycetemcomitansに感染した幼虫の生存率を変化させなかった。また，L. reuteri製剤による処理は，F. nucleatumおよびA. actinomycetemycetemcomitans感染幼虫の血球数を変化させなかった。本研究では，L. reuteri製剤が抗菌効果を発揮し，F. nucleatumに感染したG. mellonellaの生存率を高めたが，A. actinomycetemcomitansの増殖を抑制することができたのは生きたままのL. reuteriのみであった。

Periodontitis is a multifactorial inflammatory disease, and the major cause of tooth loss in adults. New therapies have been proposed for its treatment, including the use of probiotics such as Lactobacillus reuteri. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial effects of L. reuteri: live, heat-killed and culture filtrate (cell-free supernatant), on periodontopathogenic bacteria (Fusobacterium nucleatum and Aggregatibacter actinomycetemcomitans) in vitro, as well as the in vivo survival curve, hemocyte density and microbial recovery using Galleria mellonella. For in vitro assays, all preparations reduced colony forming units of F. nucleatum, while only live L. reuteri reduced the growth of A. actinomycetemcomitans. All treatments reduced periodontopathogenic bacteria growth in vivo. The treatment with the supernatant increased the survival of larvae infected with F. nucleatum more than the treatment with live L. reuteri, and none of the treatments altered the survival of A. actinomycetemcomitans-infected larvae. In addition, the treatment with L. reuteri preparations did not alter the hemocyte count of F. nucleatum- and A. actinomycetemcomitans-infected larvae. This study demonstrated that L. reuteri preparations exerted antimicrobial effects and increased the survival of G. mellonella infected by F. nucleatum, although only live L. reuteri was able to reduce the growth of A. actinomycetemcomitans in vitro.

© The Author(s) 2020. Published by Oxford University Press on behalf of FEMS.