凍結保存を歯胚移植に応用し、歯根の発生と歯の萌出を目指す

Application of cryopreservation to tooth germ transplantation for root development and tooth eruption.

• Xinghan Li
• Megumi Nakamura
• Weidong Tian
• Yasuyuki Sasano

抄録

凍結保護剤の浸透の問題を解決するために、エナメル質器官の頸部縁が大きく開いたマウスの歯胚を凍結保存し、レシピエントマウスに移植してその有効性を検証した。生後8日目のドナーマウスの右上第一大臼歯の歯胚を採取し，凍結保存期間に応じて，凍結保存なし，1週間，1ヶ月，3ヶ月の4つのグループに分類した．ドナーマウスの歯胚は、8日齢のレシピエントマウスの右上第一大臼歯胚窩に移植された。左上第一大臼歯はコントロールとして用いた。移植後1週間、2週間、3週間後に移植の結果を評価した。立体顕微鏡で観察したところ，移植後3週目にはほとんどの移植歯が萌出していた．マイクロコンピュータ断層撮影では，対照群と同様に移植群でも歯根の伸長が認められた．凍結保存した移植歯と凍結保存していない移植歯の間には有意な差はなかったが，凍結保存した歯の歯根は対照歯の歯根よりも有意に短かった．組織学的検査では，すべての移植群で歯根と歯根膜の形成が認められた．これらの結果から，冷凍保存された歯胚を移植することで，その後の歯根の伸長や歯の萌出が促進されることが示唆された．

We cryopreserved mouse tooth germs with widely open cervical margins of the enamel organ to overcome difficulties in cryoprotectant permeation and tested their efficacy by transplanting them into recipient mice. The upper right first molar germs of 8-day-old donor mice were extracted and categorized into the following four groups according to cryopreservation time: no cryopreservation, 1 week, 1 month, and 3 months. The donor tooth germs were transplanted into the upper right first molar germ sockets of the 8-day-old recipient mice. The upper left first molars of the recipient mice were used as controls. The outcome of the transplantation was assessed at 1, 2, and 3 weeks after transplantation. Stereomicroscopic evaluation revealed that most of the transplanted teeth erupted by 3 weeks after transplantation. Micro-computed tomography analysis revealed root elongation in the transplanted groups as well as in the controls. There was no significant difference between the cryopreserved and non-cryopreserved transplanted teeth, but the roots of the cryopreserved teeth were significantly shorter than those of the control teeth. Histological examination revealed root and periodontal ligament formations in all the transplanted groups. These results suggest that the transplantation of cryopreserved tooth germs facilitates subsequent root elongation and tooth eruption.