塩化セチルピリジニウムと酢酸クロルヘキシジンの組み合わせ：グラム陽性／陰性細菌および真菌の迅速な殺菌に対する有望な候補

Combination of Cetylpyridinium Chloride and Chlorhexidine Acetate: A Promising Candidate for Rapid Killing of Gram-Positive/Gram-Negative Bacteria and Fungi.

抄録

抗菌剤の開発において、異なる作用機序を持つ薬剤を併用することにより、抗菌活性が増強される可能性が示されている。本研究では，塩化セチルピリジニウム（CPC）/酢酸クロルヘキシジン（CHA）配合剤の抗菌・抗真菌活性を初めて評価し，グラム陽性菌/グラム陰性菌および真菌を迅速に死滅させる普遍的な濃度を提案した。まず、CPCとCHAを単独または組み合わせて使用した場合の最小発育阻止濃度（MIC）を測定した結果、併用処理により、試験したグラム陽性/グラム陰性細菌および真菌に対するMICが1/8-1/2に低下することが示された。増殖曲線アッセイでは、CPCとCHAはMICと同程度の濃度で、試験した微生物に対してダイナミックな複合効果を示した。さらに、これら2つの薬剤の併用は、蛍光顕微鏡とSEM画像、および可溶性タンパク質の測定によって示されたように、殺生物活性を高めることができた。さらに重要なことは、in vitroの急性眼刺激性試験と皮膚刺激性試験で、CPCとCHAを組み合わせた薬剤を短期間接触させても、哺乳類の粘膜や皮膚にダメージを与えないことが示されたことである。一言で言えば、CPC/CHAコンビネーションは、哺乳類の粘膜や皮膚に急性刺激を与えることなく、試験したグラム陽性/グラム陰性細菌および真菌に対して幅広い抗菌・抗真菌活性を示し、個人用消毒剤の選択に新たな視点を提供した。

Combined use of the present antimicrobial drugs has been proved to be an alternative approach for antimicrobial agents' development since the co-existed of the drugs working in different mechanism have been demonstrated potentially enhance their antimicrobial activity. In this work, antibacterial and antifungal activity of the cetylpyridinium chloride (CPC)/chlorhexidine acetate (CHA) combination was evaluated for the first time, while a universal concentration for the rapid killing of gram-positive/gram-negative bacteria and fungi was also proposed. The minimum inhibitory concentrations (MIC) of CPC and CHA used alone or in combination were first measured, showing that the combined treatment decreased the MIC against tested gram-positive/gram-negative bacteria and fungi to 1/8-1/2. Growth curve assays demonstrated CPC and CHA had dynamic combined effects against the tested microorganisms at the concentration equal to MIC. Besides, combined use of these two drugs could also enhance their biocidal activity, which was illustrated by fluorescence microscopy and SEM images, as well as soluble protein measurement. More importantly, in vitro acute eye and skin irritation tests showed short-term contact with CPC/CHA combination would not cause any damage to mammalian mucosa and skin. In a word, CPC/CHA combination exhibited broad-spectrum antibacterial and antifungal activity against tested gram-positive/gram-negative bacteria and fungi while without any acute irritation to mammalian mucosa and skin, providing a new perspective on the selection of personal disinfectants.