低濃度のブドウ種子エキスは、骨芽細胞の形態、細胞接着、およびミネラル化を維持する

Low concentrations of grape seed extract maintain osteoblast morphology, cell adhesion, and mineralization.

抄録

平均寿命の伸びにより、骨リモデリングのアンバランスを特徴とする骨粗鬆症の発生率が高くなっています。骨粗鬆症の治療にはいくつかの薬剤が使用されているが、そのほとんどは望ましくない副作用を促進する。本研究では、プロアントシアニジンを豊富に含む2種類の低濃度のブドウ種子エキス（GSE）のMC3T3-E1骨芽細胞への影響を評価した。細胞は骨形成培地で培養し、コントロール（C）、0.1 µg/mL GSE（GSE0.1）、1.0 µg/mL GSE（GSE1.0） グループに分け、細胞の形態、接着、増殖、in situ アルカリホスファターゼ（ALP）検出、ミネラル化、オステオポンチン（OPN）免疫局在化を評価しました。得られたデータは、5％の有意差のある統計検定により解析した。細胞形態は両GSE濃度で維持されたが、細胞接着は全グループで3日以内に有意に増加した。細胞増殖は、培養7日目に有意に増加し、その後すべての実験期間で有意に減少したが、それらの間に統計的な差はなかった。ALPのin situ検出とミネラル化は時間の経過とともに増加したが、各期間内では、グループ間の統計的な差は見られなかった。オステオポンチンの発現は、GSE0.1群では24時間後に強度が増し、規則的に分布した。3日後、OPNの発現はコントロール群でより強く、次いでGSE0.1群、GSE1.0群で強かった。得られたデータは、低濃度のGSEは形態に影響を与えず、骨芽細胞の機能的活性を刺激する可能性があることを示唆している。

The increase in life expectancy has led to a higher incidence of osteoporosis, characterized by an imbalance in bone remodeling. Several drugs are used for its treatment, but most promote undesirable side effects. The present investigation evaluated the effects of two low concentrations of grape seed extract (GSE) rich in proanthocyanidins on MC3T3-E1 osteoblastic cells. The cells were cultured in an osteogenic medium and divided into control (C), 0.1 µg/mL GSE (GSE0.1), and 1.0 µg/mL GSE (GSE1.0) groups to evaluate cell morphology, adhesion, and proliferation, in situ alkaline phosphatase (ALP) detection, mineralization and immunolocalization of osteopontin (OPN). The data obtained were analyzed by statistical tests for a significance of 5%. Cell morphology was maintained with both GSE concentrations, whereas cell adhesion significantly increased within three days in all groups. Cell proliferation increased significantly at seven days of culture, followed by a significant decrease in all experimental periods, with no statistical difference among them. In situ detection of ALP and mineralization increased with time, but within each period, no statistical differences among groups were observed. The expression of osteopontin was distributed regularly with more intensity after 24 hours in the GSE0.1 group. After three days, OPN expression was more intense in the control group, followed by GSE0.1 and GSE1.0 groups. Data obtained suggest that low concentrations of GSE do not affect the morphology and may stimulate the functional activity of osteoblastic cells.