唾液中のmiR-150-5pは歯周炎重症度の指標であり、AIFM2を標的としてヒト歯根膜線維芽細胞の挙動を制御する

Salivary miR-150-5p as an indicator of periodontitis severity and regulator of human periodontal ligament fibroblast behavior by targeting AIFM2.

抄録

目的:

本研究の目的は、歯周炎の発症および進行におけるmiR-150-5pの役割を評価し、その機能の根底にある潜在的な分子メカニズムを明らかにするとともに、歯周炎の新規バイオマーカーを探索することである。

OBJECTIVE: This study aimed to evaluate the role of miR-150-5p in the onset and progression of periodontitis, and reveal the potential molecular mechanism underlying its function and to explore a novel biomarker for periodontitis.

背景:

歯周炎は成人の歯を失う主な原因であり、その早期発見と予防のためのバイオマーカーの必要性が強調されている。miR-150-5p と Fuscobacterium nucleatum が関連する疾患との関連から、miR-150-5p が歯周炎に関与している可能性が示唆された。

BACKGROUND: Periodontitis is the leading cause of tooth loss in adults, emphasizing the need for a biomarker to improve its early detection and prevention. The association of miR-150-5p with diseases related to Fuscobacterium nucleatum implies its potential involvement in periodontitis.

方法:

歯周炎患者（n=77）と健常人（n=43）の唾液中のmiR-150-5pの発現をPCR法で評価した。ヒト歯肉線維芽細胞（HGF）を骨形成培地で誘導した。HGFの増殖と遊走に対するmiR-150-5pの制御効果は、CCK8とトランスウェルアッセイで評価した。骨形成分化はウェスタンブロッティングによる対応因子の発現に基づいて推定し、炎症反応はELISAを用いた炎症性サイトカインレベルの測定によって評価した。

METHODS: The expression of miR-150-5p in the saliva of patients with periodontitis (n = 77) and healthy individuals (n = 43) was assessed by PCR. Human gingival fibroblasts (HGFs) were induced with an osteogenic culture medium. The regulatory effect of miR-150-5p on the proliferation and migration of HGFs was assessed by CCK8 and transwell assays. Osteogenic differentiation was estimated based on the expression of corresponding factors through western blotting, and the inflammatory response was evaluated by measuring the levels of pro-inflammatory cytokines using ELISA.

結果:

歯周炎患者では miR-150-5p の有意な発現上昇が観察され、歯周炎の重症度や歯周病指数と密接 に関連していた。HGFでは、骨形成誘導（OI）によりmiR-150-5pレベルが上昇し、AIFM2の発現を負に制御した。miR-150-5pをサイレンシングすると、OIによるHGFの増殖と遊走の抑制が有意に抑制された。miR-150-5pの抑制はまた、炎症と骨形成分化を 緩和し、AIFM2のノックダウンによりその作用は逆転 した。

RESULTS: Significant upregulation of miR-150-5p was observed in patients with periodontitis, which sensitively distinguished them and was closely associated with the severity and periodontal index of the condition. In HGFs, osteogenic induction (OI) resulted in increased miR-150-5p levels, which negatively regulated the expression of AIFM2. Silencing miR-150-5p significantly attenuated OI-induced suppression of proliferation and migration of HGFs. The silencing also alleviated inflammation and osteogenic differentiation, which was reversed upon AIFM2 knockdown.

結論:

歯周炎において上昇したmiR-150-5pは、病態の発生と悪化を示す診断バイオマーカーとして機能した。miR-150-5pをサイレンシングすると、AIFM2を負に調節することにより、HGFの骨形成分化と炎症が抑制された。

CONCLUSION: Upregulated miR-150-5p in periodontitis served as a diagnostic biomarker, indicating the occurrence and aggravation of disease condition. Silencing miR-150-5p inhibited the osteogenic differentiation and inflammation of HGFs by negatively modulating AIFM2.