プロテオミクス解析のための凍結保存組織からのヒト成体心筋細胞の単離のためのGENTIL法

The GENTIL Method for Isolation of Human Adult Cardiomyocytes from Cryopreserved Tissue for Proteomic Analyses.

抄録

心不全は臨床的にも経済的にも深刻な医療問題であり、その臨床的進行は病的な心臓リモデリングと関連している。心不全の不均一性、進行した心不全を正確に表現する動物モデルの欠如、新鮮なヒト心筋組織へのアクセスが限られているため、疾患発症過程における心筋細胞の細胞型特異的メカニズムや状況特異的機能についてはほとんど知られていない。心血管系の生理学および疾患に関連するプロテオームの変化を解明するために、質量分析がますます応用されるようになってきているが、ほとんどの研究はホモジナイズされた組織を用いている。したがって、心不全の病態生理の根底にある複雑な細胞型特異的分子メカニズムをより深く理解するためには、単離された心筋細胞を用いた新しい研究が必要である。本章では、プロテオーム解析に用いるために、凍結保存したヒト心筋組織から心筋細胞を単離するための、サンプルハンドリングにおける最近の技術開発を取り入れたGENTIL法について述べる。

Heart failure is a serious clinical and economic health care problem, and its clinical progression is linked to pathological cardiac remodeling. Due to the heterogeneity of heart failure, lack of animal models to accurately represent advanced heart failure, and limited access to fresh human cardiac tissue, little is known regarding cell-type-specific mechanisms and context-specific functions of cardiomyocytes during disease development processes. While mass spectrometry has been increasingly applied to unravel changes in the proteome associated with cardiovascular physiology and disease, most studies have used homogenized tissue. Therefore, new studies using isolated cardiomyocytes are necessary to gain a better understanding of the intricate cell-type-specific molecular mechanisms underlying the pathophysiology of heart failure. This chapter describes the GENTIL method, which incorporates recent technological developments in sample handling, for isolation of cardiomyocytes from cryopreserved human cardiac tissues for use in proteomic analyses.