ヒトリンパ系細胞におけるエンドウおよびレンズ豆レクチンの受容体：レクチンが定義する細胞サブクラスが異なることを示す

Receptors for pea and lentil lectins on human lymphoid cells: demonstration of distinct lectin-defined cell subclasses.

• D H Boldt

抄録

レクチンは細胞表面の糖質研究に有用なプローブである。エンドウ（PL）とレンズ豆（LL）のレクチンは，それぞれ糖ペプチドのコア領域にあるフコシル残基と2つのα-マンノシル残基を結合させる必要があるが，外鎖の炭水化物の違いによって相対的な結合親和性が変化する可能性がある。我々は，[125I]-PL および LL を用いた結合研究と，フルオレセイン共役（FITC）-PL および-LL を用いたフローサイトメトリーを用いて，末梢リンパ球との相互作用を研究した．両レクチンのリンパ球への結合は可逆的であり，α-メチルマンノースによって阻害された．スカッチャード解析では、各レクチンの受容体は2つのクラスで一致していた。フローサイトメトリー分析では、細胞間の受容体密度にばらつきがあることが示された。リンパ球の６５％がＰＬ（平均２×１０(6)受容体／細胞）と結合し、４５％がＬＬ（平均３×１０(6)受容体／細胞）と結合していた。競合試験では，相互に阻害されることが示されたが，フローサイトメトリーでは，他のレクチンの 20 倍モル過剰にもかかわらず，FITC-PL または-LL の結合が持続していることが明らかになった．リンパ球上のPLおよびLLの受容体の分布は以下の通りであった。リンパ球の45％はPLとLLの両方に結合し，リンパ球の20％はPL単独に結合し，リンパ球の35％はPLとLLの両方に結合していた．PL と LL の結合要件は類似しており、リンパ球上の受容体間で重複しているにもかかわらず、それぞれのレクチンに特異的な受容体のサブセットが存在するようである。これらの結果は、リンパ球表面上の微妙な糖質の違いを識別するPLとLLの能力を反映している可能性がある。

Lectins are useful probes for studying cell surface glycoconjugates. Pea (PL) and lentil (LL) lectin each requires for binding a fucosyl- and two alpha-mannosyl residues in core regions of glycopeptides, but differences in outer chain carbohydrates may alter their relative binding affinities. We used binding studies with [125I]-PL and LL and flow cytometry with fluorescein-conjugated (FITC)-PL and -LL to study their interactions with peripheral lymphocytes. Binding of both lectins to lymphocytes was saturable, reversible, and inhibited by alpha-methyl mannose. Scatchard analyses were consistent with two classes of receptors for each lectin. Flow cytometric analyses demonstrated that cell to cell receptor densities varied. Sixty-five percent of lymphocytes bound PL (mean 2 X 10(6) receptors/cell) and 45% bound LL (mean 3 X 10(6) receptors/cell). Competition studies demonstrated mutual inhibition, but flow cytometry revealed persistent FITC-PL or -LL binding depsite 20-fold molar excess of the other lectin. Distributions of receptors for PL and LL on lymphocytes were as follows: 45% of lymphocytes bound both PL and LL; 20% of lymphocytes bound PL alone; 35% of lymphocytes bound neither PL nor LL. Despite similar binding requirements for PL and LL and overlap between their receptors on lymphocytes, there appear to be subsets of receptors specific for each lectin. These results may reflect abilities of PL and LL to discriminate subtle carbohydrate differences on lymphocyte surfaces.