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J Chromatogr.1993 May;615(1):174-9.

高速液体クロマトグラフィーによる血清および尿中の新規セファロスポリンSCE-2787の定量

Determination of a new cephalosporin, SCE-2787, in serum and urine by high-performance liquid chromatography.

PMID: 8340458

抄録

新規セファロスポリン(I, SCE-2787)の高速液体クロマトグラフィーによる定量法を開発した。血清タンパク質をアセトニトリルで沈殿させることにより血清から分析物を抽出した。タンパク質を含まない上清からアセトニトリルをジクロロメタンで抽出した。尿は単に移動相で希釈した。分離は逆相カラム(Nucleosil 5C18、内径125 mm x 4.0mm、平均粒子径5ミクロン)を用いたイオンペアクロマトグラフィーで行った。ガードカラムはPerisorb RP18(30 mm x 4.0 mm I.D.、粒子径30-40ミクロン)。移動相は15mMヘプタンスルホン酸(pH3.2)を含むアセトニトリル-緩衝液(4.5:95.5, v/v)。検出はダイオードアレイ検出器を用いて235nmで行い、紫外線スペクトルを記録した。アッセイは高感度、高精度、高精度で迅速であった。特異性は、Iの紫外スペクトルをオンラインで記録し、β-ラクタマーゼによる酵素分解によっても制御された。薬物動態試験における健康なボランティアの血清および尿の分析において、干渉は観察されなかった。

A high-performance liquid chromatographic method for the determination of a new-broad spectrum cephalosporin (I, SCE-2787) has been developed. The analyte was extracted from serum by precipitation of serum proteins with acetonitrile. Acetonitrile was extracted from the protein-free supernatant by dichloromethane. Urine was simply diluted with mobile phase. Separation was performed by ion-pair chromatography on a reversed-phase column (Nucleosil 5C18; 125 mm x 4.0 mm I.D.; 5 microns average particle size). The guard column was Perisorb RP18 (30 mm x 4.0 mm I.D.; 30-40 microns particle size). The mobile phase was acetonitrile-buffer solution containing 15 mM heptanesulphonic acid (pH 3.2) (4.5:95.5, v/v). Detection was performed at 235 nm with a diode-array detector, which also served to record ultraviolet spectra. The assay was sensitive, precise, accurate and fast. Specificity was controlled by on-line recording the ultraviolet spectrum of I and also by enzymic degradation with beta-lactamase. No interferences were observed during the analysis of serum and urine of healthy volunteers in pharmacokinetic studies.